Automated HPLC method development and robustness tests for abacavir, lamivudine, dolutegravir and their related compounds in Triumeq drug produ

Význam tématu

Analytická separace složitých farmaceutických směsí je klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti léčivých přípravků. Automatizace vývoje metod HPLC přináší zrychlení procesu, snižuje závislost na manuálních zkušenostech obsluhy a minimalizuje náklady spojené s opakovanými experimenty. V případě léčiva Triumeq obsahujícího abacavir, lamivudin a dolutegravir se jedná o více než 20 analytů, jejichž spolehlivé rozlišení je nezbytné pro kontrolu čisto­ty a detekci nežádoucích příbuzných sloučenin.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo představit plně automatizovaný pracovní postup pro vývoj a robustnost HPLC metody využívající ChromSwordAuto Chromeleon Connect v kombinaci s přístrojem Thermo Scientific Vanquish Core. Průběh zahrnoval:

• Metod scouting pro předběžný výběr kolon, elučních systémů a gradientů
• Rychlou a jemnou optimalizaci parametrů metody
• Robustnostní testy podle principů analytické kvality by design
• Automatizované zpracování dat

Použitá metodika a instrumentace

Všechny kroky byly provedeny automaticky:

• Přístrojová sestava: Vanquish Core Quaternary HPLC s Diode Array detektorem a ChromSwordAuto Chromeleon Connect
• Kolony: C18 a fenylové fáze od Thermo Scientific (např. Acclaim 120 C18, Syncronis C18, Hypersil Gold Phenyl, PFP)
• Mobilní fáze: vodné eluenty s formátovými pufry v pH 2,7–7,1 a organické eluenty methanol/acetonitril
• Gradienty a parametry: průběh gradientu, teplota kolony (25–40 °C), objem injekce (2–10 µL), průtok 1,0 mL/min, vlnové délky 275 a 300 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Automatizovaný workflow snížil dobu potřebnou pro vývoj metody a robustnostní testy na přibližně 5,5 dne, což je zhruba jedna pětina času manuálního postupu. Rychlá optimalizace snížila celkový čas na 11 hodin a jemná optimalizace zlepšila rozlišení klíčových párů píků nad hodnotu USP ≥ 2,0 při zachování symetrie píků mezi 0,9 a 2,1. Robustnostní studie potvrdily stabilní výkon metody v širokém rozmezí pH, teploty a bodu zlomu gradientu.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje:

• Rychlé nalezení optimálních separačních podmínek pro komplexní vzorky
• Snížení manuální práce a rizika chyb operátora
• Shodu s principy analytické kvality by design
• Vysokou reprodukovatelnost a robustnost separace příbuzných látek

Budoucí trendy a možnosti využití

Automatizované platformy pro vývoj chromatografických metod budou pravděpodobně integrovány s umělou inteligencí pro prediktivní návrhy parametrů a adaptivní optimalizaci v reálném čase. Rozšíření této technologie na jiné analytické techniky jako kapilární elektroforézu nebo GC by mohlo dále zrychlit vývoj metod v mnoha oblastech farmacie, potravinářství či environmentální analytiky.

Závěr

Použití ChromSwordAuto Chromeleon Connect ve spojení s Vanquish Core umožnilo efektivní a plně automatizovaný vývoj a validaci HPLC metody pro Triumeq. Proces výrazně urychlil vývoj, snížil náklady a zajistil vysokou kvalitu rozlišení všech analyzovaných látek.

Reference

1. Thermo Fisher Scientific Application Note 000582, Development and validation of a HPLC-DAD method for simultaneous determination of abacavir, lamivudine, dolutegravir and related compounds in Triumeq
2. ViiV Healthcare Press Release FDA approval for Triumeq
3. Belk D. Pharma’s 50 Best Sellers True Cost of Health-Care
4. Tol T et al Journal of Chromatography A 1432 (2016) 26–38