Automated Creation of Chromatographic Methods for Analysis with an ACQUITY QDa Detector Using Empower Sample Set Generator

Význam tématu

Optimalizace ionizačních parametrů v LC-MS klíčově ovlivňuje citlivost analýzy, zejména u nechromoforických látek, jako je memantin hydrochlorid. Rychlá a bezchybová tvorba metod zkracuje dobu vývoje a zvyšuje spolehlivost výsledků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo demonstrovat automatické generování chromatografických metod pro analýzu memantinu HCl pomocí Empower Sample Set Generator (SSG). Studie se zaměřila na vliv dvou proměnných ionizačního zdroje – teploty sondy a napětí na kuželu – na citlivost detekce pomocí ACQUITY QDa.

Použitá metodika a instrumentace

• Systém: Waters Arc Premier System propojený s 2998 PDA a ACQUITY QDa Mass Detector (ESI+).
• Kolona: CORTECS C18+ 2,7 µm, 3 mm × 75 mm při 45 °C.
• Mobilní fáze: A – 0,1 % formiová kyselina ve vodě; B – 0,1 % formiová kyselina v acetonitrilu.
• Objem injekce: 3,0 µL.
• MS parametry: ESI+, SIR m/z 180,2, teplota sondy 400–600 °C, kuželové napětí 5–20 V, kapilární napětí 0,8 kV, režim sběru dat centroid.
• Provozní mytí: 50:50 voda/methanol pro vzorkovou cestu, 90:10 voda/acetonitril pro těsnění.
• Automatizace pomocí Empower SSG: import CSV se sadou proměnných, načtení základní metody, přiřazení faktorů, nastavení názvů a equilibration time, generování sample set metody.

Hlavní výsledky a diskuse

Automaticky vygenerovaná metoda obsahovala 12 kombinací teploty sondy a napětí kuželu včetně počáteční rovnováhy a blanků. Analýzy ukázaly, že nejvyšší poměr signál/šum (s/n) pro memantin HCl byl při teplotě sondy 600 °C a kuželovém napětí 15 V. Tento výsledek potvrdil význam optimalizace těchto parametrů pro maximální citlivost.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné snížení času potřebného k vytvoření metod (z 12 manuálních na jediný automatický proces).
• Eliminace transkripčních chyb při ručním nastavování parametrů.
• Jednoduchá příprava komplexních experimentálních designů jako ready-to-run sekvence injekcí.
• Vhodné pro vývoj, validaci a rutinní QC analýzy nechromoforických a dalších analytů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření automatizace na pokročilé návrhy experimentů s více faktory, integrace výsledků do LIMS, využití strojového učení pro predikci optimálních parametrů a aplikace v high-throughput screening v biofarmaceutickém a farmaceutickém průmyslu.

Závěr

Empower Sample Set Generator výrazně zefektivnil tvorbu chromatografických metod pro ACQUITY QDa detector, minimalizoval chyby a umožnil rychlou optimalizaci ionizačních parametrů pro citlivou detekci memantinu HCl.

Reference

• WebMD. Memantine Oral. 2022.
• Maziarz M, Wrona M, McCarthy SM. Benefits of Using QDa Mass Detection for Quantitative Analysis of Non-Chromophoric Memantine HCl in Tablet Formulation. Waters Application Note 720005179, 2014.