Efficient Method Development for the Analysis of Naphazoline Hydrochloride, Pheniramine Maleate, and Associated Related Substances Using a Systematic Screening Protocol

Význam tématu

Účinná a spolehlivá analýza aktivních složek naphazolinu hydrochloridu a pheniraminu maleátu spolu s jejich příbuznými látkami je klíčová pro kontrolu kvality oftalmických přípravků. Absence jednotné chromatografické metody pro stanovení nečistot těchto dvou API v jedné analýze komplikuje validaci a přenos metod napříč laboratořemi. Systémový screeningový protokol zrychluje vývoj robustních UHPLC metod, zajišťuje reprodukovatelné separace a zvyšuje efektivitu práce v průmyslové i akademické praxi.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout jedinou UHPLC metodu pro simultánní stanovení naphazolini hydrochloridu, pheniraminu maleátu a všech souvisejících nečistot dle farmakopejních monografií. Studie využila předem definovaný protokol kroků scouting, screening a optimalizace hlavních selektivních faktorů (pH, typ kolon, organický modifikátor) a ověřila splnění kritérií rezoluce, tvaru píků a retence.

Použitá metodika a instrumentace

Byla použita UHPLC platforma Arc Premier System vybavená správou kolony a přepínáním modifikátorů, detekcí PDA a ACQUITY QDa Mass Detektorem. Data se zpracovávala v Empower 3 CDS, včetně automatizované tvorby metod, sledování píků, skórovacích reportů a ověřování čistoty spektrálních píků.

Hlavní výsledky a diskuse

Scouting fáze odhalila výhodu nízkého pH pro retenci všech analytů. Screeningem různých kolon Premier (C18, Phenyl-Hexyl, BEH C18 AX) a organických modifikátorů (acetonitril/methanol) nejlépe obstála kombinace Premier CSH C18 a methanolu. Optimalizací délky kolony na 150 mm, teploty 42 °C a gradientu bylo dosaženo USP rozlišení ≥1,5 mezi všemi píkami a faktoru retence ≥2. Systémová vhodnost prokázala RSD retencí ≤0,05 % a ploch píků ≤0,58 % pro šestinásobné opakování.

Přínosy a praktické využití metody

• Umožňuje simultánní stanovení API a souvisejících nečistot v jediné analýze,
• zkracuje čas a snižuje spotřebu organic modifierů díky automatizovanému přepínání kolon a pufrů,
• zajišťuje rychlou identifikaci a potvrzení čistoty píků pomocí PDA a QDa detektoru,
• zvyšuje konzistenci a usnadňuje validaci a přenos metody mezi laboratořemi.

Budoucí trendy a možnosti využití

Do budoucna lze protokol rozšířit o další režimy dělení, např. chiralitu nebo iontovou chromatografii. Integrace s pokročilými softwarovými nástroji pro strojové učení může dále zefektivnit výběr podmínek a předpověď selektivity. Možnosti rozšíření o simultánní detekci dalších API v kombinovaných formulacích otevírají cestu k univerzálním multi-residuálním analýzám.

Závěr

Systémový screeningový protokol v kombinaci s inteligentní instrumentací a CDS nástroji výrazně urychlil vývoj a optimalizaci UHPLC metody pro naphazolini hydrochlorid, pheniramin maleát a jejich příbuzné látky. Navržená metoda splňuje veškerá farmakopejní kritéria rozlišení, opakovatelnosti a specifity, což umožní její rychlou validaci a nasazení v rutinní kontrole kvality.

Reference

1. Hong P, McConville P. A Complete Solution to Perform a Systematic Screening Protocol for LC Method Development. Waters White Paper, 720005268, 2018.
2. USP Monograph, Naphazoline Hydrochloride and Pheniramine Maleate Ophthalmic Solution, USP40-NF35.
3. European Pharmacopeia Monograph, Naphazoline Hydrochloride, EP 10.0.
4. European Pharmacopeia Monograph, Pheniramine Maleate, EP 10.0.
5. Maziarz M, Rainville PD. Automated Creation of Chromatographic Methods for Analysis with an ACQUITY QDa Detector Using Empower Sample Set Generator. Waters Application Brief, 720007775, 2022.