High speed analysis of DNPH-Aldehyde

Význam tématu

Detekce a kvantifikace aldehydů v plynné nebo kapalné fázi je klíčová v environmentálním a průmyslovém monitoringu, ve farmacii či v potravinářské analýze. Derivatzace pomocí 2,4-dinitrofenylhydrazinu (DNPH) umožňuje stabilizaci reaktivních karbonylových sloučenin a jejich následnou chromatografickou analýzu s vysokou citlivostí a selektivitou. Vyšší rychlost a účinnost separace se promítá do zkrácení doby analýzy a zvýšení propustnosti laboratoře.

Cíle a přehled studie

Metoda popsaná v aplikaci se zaměřuje na:

• Vyvinutí rychlé reverzní fázové LC metody pro separaci DNPH derivátů aldehydů.
• Optimální nastavení gradientu a provozních podmínek pro 13 cílových analytů.
• Demonstraci vysoké účinnosti kolony Shim-pack XR-ODS a její vhodnosti pro rutinní použití.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky aldehydů byly nejprve derivatizovány 2,4-DNPH za vzniku stabilních hydrozónů. Analýza proběhla na přístroji Shimadzu Prominence-i LC-2030C 3D Plus vybaveném kolonou Shim-pack XR-ODS (75 mm × 4,6 mm, 2,2 µm). Mobilní fáze sestávala z:

• Fáze A: voda/THF (8/2, v/v)
• Fáze B: acetonitril

Gradient byl nastaven od 20 % do 60 % fáze B během 15 minut, návrat k počáteční kompozici v 15,01 min, celkové době analýzy 17 minut. Tekutina protékala kolonu rychlostí 1,5 mL/min při 40 °C, detekce probíhala UV při 360 nm, objem injekce 10 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila separaci všech 13 analyzovaných DNPH-derivátů aldehydů v čase kratším než 15 minut s dobrou špičkovou účinností. Kolona XR-ODS s částicemi 2,2 µm zajistila ostré a dobře rozlišené špičky i u strukturálně podobných sloučenin. Údaje o opakovatelnosti retence a plošného signálu ukázaly relativní standardní odchylky nižší než 1,5 % a 3,0 %. Detekční limity se pohybovaly v nižších µg/L, což předurčuje metodu pro monitoring nízkých koncentrací v ovzduší nebo v biologických matricích.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí následující výhody:

• Rychlá analýza s vysokou propustností vzorků až několik desítek denně.
• Vysoká selektivita a citlivost díky UV detekci derivátů DNPH.
• Minimální spotřeba organických rozpouštědel a nižší provozní náklady.
• Univerzální použití v environmentálním, průmyslovém i farmaceutickém sektoru.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k integraci techniky mikroproužkové LC pro další zkrácení analýzy a snížení spotřeby rozpouštědel. Implementace hmotnostní detekce (LC–MS) rozšíří možnost kvantifikace stopových aldehydů v komplexních matricích. Automatizované online odběry a on‐site analýza by mohly přinést reálný časový monitoring emisí.

Závěr

Popsaná reverzní fázová LC metoda s kolonkou Shim-pack XR-ODS a UV detekcí DNPH derivátů aldehydů představuje rychlý, citlivý a reprodukovatelný postup vhodný pro rutinní analýzu 13 klíčových aldehydů. Její vysoká účinnost a krátká doba analýzy zvyšují propustnost laboratoře a snižují náklady na spotřebu rozpouštědel.

Reference

Žádné další reference uvedeny.