Limit of choline in succinyl- choline on a Metrosep C Supp 1 - 150/4.0 closely following USP

Význam tématu

Succinylcholin je krátkodobý myorelaxant široce využívaný při tracheální intubaci. Kontrola chemické čistoty této látky je klíčová pro bezpečnost pacienta. Cholin, jako stavební blok succinylcholinu, se považuje za nežádoucí nečistotu, jejíž koncentrace musí splňovat přísné farmaceutické normy.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace metody bylo stanovit koncentraci cholinu v roztoku succinylcholinu a porovnat výsledky s požadavky USP. Studie ilustruje úpravu chromatografických podmínek, která se odlišuje od předepsaných parametrů USP, avšak přináší validní výsledky odpovídající farmaceutickým standardům.

Použitá metodika

Vzorek: farmaceutický roztok succinylcholinu 50 mg/mL (netoxický, pro analytické účely).
Příprava vzorku: ředění 1 : 20 ultrapure vodou.
Chromatografie: kationtově výměnná kolona Metrosep C Supp 1 – 150/4.0 (6.1052.420) v kombinaci s ochrannou kolonou Metrosep C Supp 1 Guard/4.0 (6.1052.500).
Mobilní fáze: 4,0 mmol/L HNO3, 50 µg/L rubidia, 4,8 % acetonitrilu. Potlačení signálu iontů prováděno sekvenčním suppressorem s regenerací uhličitanem sodným a hydrogen uhličitanem sodným.
Provozní podmínky: průtok 1,0 mL/min; objem injekce 5 µL; teplota kolony 40 °C; teplota vzorku 4 °C; doba analýzy 18 minut.

Použitá instrumentace

• 930 Compact IC Flex Oven/SeS/Deg (2.930.2460)
• IC Conductivity Detector (2.850.9010)
• 889 IC Sample Center – chlazený (2.889.0020)
• 800 Dosino pro regeneraci suppressoru (2.800.0010)
• MSM-HC Rotor C (6.2842.200)
• IC vybavení pro regeneraci Dosino (6.5330.190)

Hlavní výsledky a diskuse

Stanovená koncentrace cholinu ve vzorku činila 465 mg/L, což odpovídá 0,93 % hmotnostních a překračuje limity USP. Ostatní kationty (Na+, K+, Ca2+) nebyly v měřitelných hladinách detekovány. Reprodukovatelnost metody (RSD N=3) byla 0,5 %, system suitability (RSD N=8) rovněž 0,5 % a rozlišení cholinu vůči nejbližšímu píku činilo 6,79. Diskuse ukazuje, že i při mírných odchylkách v kompozici eluentu metoda splňuje kritéria přesnosti, přesnosti a selectivity.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlou a citlivou kvantifikaci cholinu jako impurity ve farmaceutických vzorcích succinylcholinu. Vysoká reprodukovatelnost, dostatečné rozlišení a jednoduchá příprava vzorku činí postup vhodným pro rutinní QC laboratoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace automatizovaných systémů přípravy vzorku pro zvýšení throughput.
• Využití alternativních detektorů (MS, UV) pro širší spektrum analyzovaných složek.
• Vývoj robustnějších kolonových materiálů odolných vůči kontaminaci a snížení doby analýzy.
• Rozšíření aplikace metody na další farmaceutické deriváty cholinu.

Závěr

Upravená metoda iontové chromatografie s potlačením detekce spolehlivě stanovuje choline jako impuritu ve succinylcholinu. Přestože se podmínky liší od USP protokolu, výsledky splňují požadované parametry kvality a poskytují vhodný nástroj pro farmaceutickou kontrolu.

Reference

• IC Application Note CS–015, Metrohm, verze 1, září 2018