Assay of Tromethamine in Pharmaceutical Formulations

Význam tématu

V laboratořích zaměřených na kontrolu kvality farmaceutických přípravků je tromethamin důležitou složkou mnoha formulací. Jeho přesné a specifické stanovení je nezbytné pro zajištění bezpečnosti a účinnosti léčiv, pro splnění regulatorních požadavků (ICH, USP) a pro rychlou odezvu v procesu vývoje i výrobní kontrole.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout robustní, přesnou a reprodukovatelnou metodu pro kvantifikaci tromethaminu v hotových farmaceutických přípravcích pomocí high-performance iontové chromatografie s potlačenou vodivostní detekcí. Metoda byla validována podle zásad USP <1225> a ICH, včetně stanovení linearity, přesnosti, citlivosti a robustnosti.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci tromethaminu byla použita iontově výměnná kolona Dionex IonPac CS20 (250×2 mm) s prekolonou CG20 (50×2 mm). Eluent tvořil 2 mM kyseliny methansulfonové (MSA) v izokratickém režimu. Provozní parametry:

• Průtok eluenta: 0,3 mL/min
• Teplota kolony: 40 °C
• Objem injekce: 2,5 µL (full loop)
• Doba běhu: 30 minut
• Detekce: potlačená vodivost s CDRS 600 suppresorem
• Automatické generování eluenta: modul EGC 500 MSA
• Analytický systém: Dionex Integrion HPIC s IC Viper konektory

Hlavní výsledky a diskuse

Optimalizovaná metoda umožnila oddělení tromethaminu od nejbližších kationtů sodíku a amonných iontů s dostatečným rozlišením (2,53 a 1,67). Lineární kalibrační závislost (1–50 mg/L) vykázala koeficient determinace blížící se jedné pro kvadratickou křivku. Preciznost metody byla v rozmezí RSD ≤0,85 % pro čas zadržení i plochu píku. Detekční a kvantifikační limity dosáhly 0,05 mg/L (LOD) a 0,015 mg/L (LOQ). Rigorous robustness tests s ±10% změnami eluentové koncentrace, průtoku a teploty prokázaly minimální odchylky klíčových parametrů (čas zadržení, asymetrie, rozlišení). V simulovaném maticovém vzorku napodobeném složením vakcínových excipientů byla metoda schopná spolehlivě detekovat tromethamin bez interferencí.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda přináší několik výhod:

• Vysoká selektivita bez potřeby derivatizace
• Možnost simultánního stanovení běžných kationtů (Na+, NH₄+) v jednom běhu
• Automatická příprava eluenta a potlačená detekce zajišťují reprodukovatelnost
• Dodržení farmaceutických norem pro kvalitu a validaci
• Vhodnost pro rutinní kontrolu i limitní testy

Budoucí trendy a možnosti využití

Ve výhledu se očekává rozšíření metod o hyphenované techniky (IC-MS), miniaturizaci kapilárních kolon, vyšší automatizaci a integraci do on-line monitorovacích systémů. Další vývoj může směřovat k zelené chromatografii, zkrácení doby analýzy a širšímu využití v biotechnologiích či environmentálních studiích.

Závěr

Navržená iontově chromatografická metoda splňuje požadavky na přesné, citlivé a robustní stanovení tromethaminu ve farmaceutických formulacích. Validace prokázala vysokou spolehlivost a metodika je připravená pro implementaci v QA/QC laboratořích.

Reference

1. Tromethamine. U.S. Pharmacopeial Convention, USP43-NF38; Rockville, MD.
2. Analyst, 1988, 113, 755.
3. J. Chromatogr., 1992, 583, 99.
4. J. Anal. Toxicol., 1984, 8, 231.
5. J. Pharm. Biomed. Anal., 2003, 31(6), 1191–1201.
6. J. Pharm. Belg., 1981, 36, 203.
7. J. Chromatogr., 1978, 145, 155.
8. J. Chromatogr., 1984, 295, 248.
9. Anal. Chem., 1980, 52, 1519–1522.
10. J. Chromatogr. A, 1995, 718(2), 305–308.
11. Validation of Compendial Methods, USP General Chapter <1225>, USP36-NF31, p. 983.
12. Johns Hopkins Institute of Vaccine Safety, komponenty a excipienty vakcín (online).