Assay for Citrate and Phosphate in Pharmaceutical Formulations Using a High-Pressure Compact Ion Chromatography System

Význam tématu

Chromatografická analýza citrátu a fosfátu je klíčová pro kontrolu kvality farmaceutických produktů, kde hrají roli jako stabilizační, chuťové nebo antikoagulační činidla. Rychlá a citlivá metoda zkracuje dobu analýzy, snižuje spotřebu elučního činidla a podporuje vysokou propustnost laboratoře.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo aktualizovat dřívější postup (AN164) pro stanovení citrátu a fosfátu v antikoagulantech pomocí moderního kompaktního vysokotlakého IC systému Integrion HPIC a mikrobore kolon IonPac AS11-HC-4 µm. Metoda nabízí rozdělení analytů z původních 10 min na 5 min při nižším průtoku elučního roztoku.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byl použit systém Thermo Scientific Dionex Integrion HPIC s elektrolyticky generovaným KOH elučním roztokem (60 mM) a zpětnou mostikovou potlačenou vodivostní detekcí. Klíčové komponenty:

• Pumpa Integrion HPIC s vysokotlakým eluentním generátorem EGC 500 KOH a trap kolonkou CR-ATC 600
• Kolonka IonPac AG11-HC guard (2 × 50 mm) a AS11-HC analýza (2 × 250 mm), 4 µm
• Dionex AERS 500 potlačovač, 2 mm, recyklační režim, 52 mA
• Dionex AS-AP autosampler, vana 10 mL, injekční objem 2,5 µL
• Teplotní kontrola kolony (35 °C) a detekční komory (20 °C)
• Chromeleon 7.2 SR4 software pro řízení a sběr dat

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla meze stanovitelnosti (LOQ) 0,03 mg/L pro fosfát a 0,06 mg/L pro citrát při 25 % injekčního objemu oproti původní metodě. Analytická liniearity jsou v rozsahu 0,5–200 mg/L (fosfát) a 0,5–50 mg/L (citrát), s koeficienty r2 ≥ 0,9997. Intradení RSD byly v rozmezí 0,18–0,34 % pro fosfát a 0,05–0,57 % pro citrát, mezidenní RSD 0,75 % a 1,25 %. Recoveries 95–106 %. Robustnost potvrzena při ±10 % změnách průtoku, teploty a koncentrace elučního činidla bez ztráty rozlišení (>1,5) a přesnosti (<2 %).

Přínosy a praktické využití metody

Výrazné zkrácení doby analýzy na 5 min a snížení spotřeby eluční kapacity na 1,75 mL/eluce umožňuje vyšší propustnost a nižší náklady. Metoda splňuje požadavky USP a poskytuje spolehlivé nástroje pro QA/QC v farmaceutickém a klinickém prostředí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj IC instrumentace směřuje k vyšším tlakovým režimům, menším průměrům kolonek a automatizaci péče o elektrolytické moduly. V budoucnu lze očekávat pokročilé senzory kvality elučního toku a integrované diagnostické nástroje pro prediktivní údržbu a optimalizaci metod v reálném čase.

Závěr

Aktualizovaná metoda na systému Integrion HPIC s mikrobore kolonkou AS11-HC-4 µm přináší vyšší efektivitu, citlivost i robustnost při stanovení citrátu a fosfátu. Splňuje farmaceutické požadavky a nabízí ekonomické i provozní výhody díky rychlejších analýzám a nižší spotřebě elučního činidla.

Reference

• Thermo Scientific. Application Note 164: Assay for Citrate and Phosphate in Pharmaceutical Formulations Using Ion Chromatography. 2004.
• DeBorba B. M., Rohrer J. S., Bhattacharyya L. Development and validation of an assay for citric acid/citrate and phosphate in pharmaceutical dosage forms using ion chromatography with suppressed conductivity detection. J. Pharm. Biomed. Anal. 2004, 36, 517–524.
• United States Pharmacopeia. General Chapter <345> Assay for Citric Acid/Citrate and Phosphate. USP 29–NF 24, 2006, pp. 2565.
• Thermo Scientific. Application Proof Note 196: Assay for Citrate and Phosphate in Pharmaceutical Formulations Using a Compact IC System. 2016.
• United States Pharmacopeia. General Chapter <1225> Validation of Compendial Methods. USP 34, 2011, pp. 778.
• Thermo Scientific. Application Update 200: Fast Anion Determinations in Environmental Waters Using a High-Pressure Compact Ion Chromatography System. 2016.
• Thermo Scientific. Technical Note 175: Configuring the Dionex Integrion HPIC System for High-Pressure RFIC. 2016.
• Anticoagulant Citrate Phosphate Dextrose (CPD) Solution, USP 29. 2016.