Analysis of ATP-Related Compounds, Histamine and Amino Acids
Aplikace | 2021 | ShimadzuInstrumentace
Analýza ATP a s ním souvisejících nukleotidů (IMP, Hx, HxR, AMP, ADP) je klíčová pro porozumění bioenergetickým procesům, buněčné signalizaci a hodnocení kvality potravin. Přesné stanovení těchto látek je nezbytné v biochemickém výzkumu, lékařské diagnostice i v potravinářském průmyslu pro sledování čerstvosti a biologické aktivity.
Dokument popisuje vysoce výkonnou reverzní fázovou chromatografii pro simultánní separaci a detekci ATP a šesti příbuzných metabolitů. Cílem je získat rychlou, reprodukovatelnou a přesnou metodu vhodnou pro rutinní analýzy v laboratořích QC a výzkumných ústavech.
Analýza proběhla na systému Nexera dual injection system při 30 °C s průtokem 0,8 mL/min a injekcí 10 µL. Kolona Shim-pack GIST C18-AQ (100×3,0 mm, 3 µm) byla využita se dvěma mobilními fázemi: A) voda/ACN 100/1 s 0,15 M H₃PO₄ a 0,225 M triethylaminu; B) voda/ACN 80/20 se stejným složením aditiv. Gradientní program: 0 % B (0–4 min) → 12 % B (11,5 min) → 100 % B (11,51–18,5 min) → 0 % B (18,51–32 min). Detekce pomocí PDA při 260 nm.
Metoda zajistila dobré rozlišení všech analyzovaných sloučenin během cca 32 minut. Pikové tvary byly symetrické, retenční časy vysoce reprodukovatelné (RSD <2 %) a bez zásadních rušivých vlivů. Tato robustnost demonstruje spolehlivost metody pro kvantitativní stanovení.
- Rychlá a přesná analýza ATP a jeho derivátů
- Vhodné pro kontrolu kvality potravin (sledování čerstvosti) a biochemický výzkum
- Aplikovatelné v lékařské diagnostice pro hodnocení energetického stavu buněk
Integrace s hmotnostní spektrometrií pro vyšší selektivitu a citlivost, miniaturizace a automatizace přípravy vzorků otevírá cestu k point-of-care aplikacím. Rozšíření metodiky na simultánní stanovení histaminu a aminokyselin v komplexních maticích představuje další směr vývoje.
Popsaná metoda na bázi Shim-pack GIST C18-AQ nabízí efektivní nástroj pro rutinní i výzkumné aplikace v oblasti analýzy ATP a příbuzných sloučenin. Vysoká efektivita separace, spolehlivost a reprodukovatelnost potvrzují její široký potenciál v analytické chemii.
Application News L554A (Shimadzu Corporation), 2021
Spotřební materiál, HPLC, LC kolony
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceShimadzu
Souhrn
Význam tématu
Analýza ATP a s ním souvisejících nukleotidů (IMP, Hx, HxR, AMP, ADP) je klíčová pro porozumění bioenergetickým procesům, buněčné signalizaci a hodnocení kvality potravin. Přesné stanovení těchto látek je nezbytné v biochemickém výzkumu, lékařské diagnostice i v potravinářském průmyslu pro sledování čerstvosti a biologické aktivity.
Cíle a přehled studie / článku
Dokument popisuje vysoce výkonnou reverzní fázovou chromatografii pro simultánní separaci a detekci ATP a šesti příbuzných metabolitů. Cílem je získat rychlou, reprodukovatelnou a přesnou metodu vhodnou pro rutinní analýzy v laboratořích QC a výzkumných ústavech.
Použitá metodika a instrumentace
Analýza proběhla na systému Nexera dual injection system při 30 °C s průtokem 0,8 mL/min a injekcí 10 µL. Kolona Shim-pack GIST C18-AQ (100×3,0 mm, 3 µm) byla využita se dvěma mobilními fázemi: A) voda/ACN 100/1 s 0,15 M H₃PO₄ a 0,225 M triethylaminu; B) voda/ACN 80/20 se stejným složením aditiv. Gradientní program: 0 % B (0–4 min) → 12 % B (11,5 min) → 100 % B (11,51–18,5 min) → 0 % B (18,51–32 min). Detekce pomocí PDA při 260 nm.
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda zajistila dobré rozlišení všech analyzovaných sloučenin během cca 32 minut. Pikové tvary byly symetrické, retenční časy vysoce reprodukovatelné (RSD <2 %) a bez zásadních rušivých vlivů. Tato robustnost demonstruje spolehlivost metody pro kvantitativní stanovení.
Přínosy a praktické využití metody
- Rychlá a přesná analýza ATP a jeho derivátů
- Vhodné pro kontrolu kvality potravin (sledování čerstvosti) a biochemický výzkum
- Aplikovatelné v lékařské diagnostice pro hodnocení energetického stavu buněk
Budoucí trendy a možnosti využití
Integrace s hmotnostní spektrometrií pro vyšší selektivitu a citlivost, miniaturizace a automatizace přípravy vzorků otevírá cestu k point-of-care aplikacím. Rozšíření metodiky na simultánní stanovení histaminu a aminokyselin v komplexních maticích představuje další směr vývoje.
Závěr
Popsaná metoda na bázi Shim-pack GIST C18-AQ nabízí efektivní nástroj pro rutinní i výzkumné aplikace v oblasti analýzy ATP a příbuzných sloučenin. Vysoká efektivita separace, spolehlivost a reprodukovatelnost potvrzují její široký potenciál v analytické chemii.
Reference
Application News L554A (Shimadzu Corporation), 2021
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Analysis of Nucleic Acid Related Substances in Fish Meat and Automatic Calculation of Freshness (K Value) Using Multi-Data Report Function
2019|Shimadzu|Aplikace
LAAN-A-LC-E309 Application News No. L536 High Performance Liquid Chromatography Analysis of Nucleic Acid Related Substances in Fish Meat and Automatic Calculation of Freshness (K Value) Using Multi-Data Report Function Compared to the muscle tissue of livestock animals, the flesh of…
Klíčová slova
atp, atphxr, hxradp, adpimp, impamp, ampfreshness, freshnessfish, fishshellfish, shellfishvalue, valuetuna, tunaȝmol, ȝmolsupernatant, supernatantrelated, relatedmuscles, musclesnews
Analysis of Nucleic Acid Related Substances
2021|Shimadzu|Aplikace
ERAS-1000-0134 LC Reversed-phase Shim-pack Series Shim-packTM GIST C18-AQ Analysis of Nucleic Acid Related Substances 134 Keywords: nucleotides, nucleosides, adenylic acid, inosinic acid, hypoxanthine, inosine 1. Hx 2. IMP 3. HxR 4. AMP 5. ADP 6. ATP (10 μmol/L) System Column…
Klíčová slova
inosine, inosinenexeratm, nexeratmnucleic, nucleicshim, shimpack, packphase, phasereversed, reversedsubstances, substancesrelated, relatedseries, seriesprogram, programmobile, mobileacid, acidrate, ratedetection
Quick Estimation of the Freshness and the Level of Putrefaction in Fish Meat Using Nexera™ Dual Injection System
2020|Shimadzu|Aplikace
Application News No. High Performance Liquid Chromatography L554A Quick Estimation of the Freshness and the Level of Putrefaction in Fish Meat Using Nexera™ Dual Injection System –Simultaneous Analysis of ATP-Related Compounds, Histamine and Amino Acids in Fish Meat– The muscles…
Klíčová slova
histamine, histamineatp, atptuna, tunahxr, hxryellowfin, yellowfinhistidine, histidineacids, acidsamino, aminocompounds, compoundsalanine, alanineimp, imprelated, relatedspoiled, spoiledanserine, anserinecarnosine
Quick Estimation of the Freshness and the Level of Putrefaction in Fish Meat Using Nexera Dual Injection System
2020|Shimadzu|Aplikace
Application News No. High Performance Liquid Chromatography L554A Quick Estimation of the Freshness and the Level of Putrefaction in Fish Meat Using Nexera™ Dual Injection System –Simultaneous Analysis of ATP-Related Compounds, Histamine and Amino Acids in Fish Meat– The muscles…
Klíčová slova
histamine, histamineatp, atptuna, tunahxr, hxryellowfin, yellowfinacids, acidshistidine, histidineamino, aminocompounds, compoundsalanine, alanineimp, imprelated, relatedspoiled, spoiledanserine, anserinecarnosine
