Analysis of Water-soluble Vitamins

Význam tématu

Analýza vodou rozpustných vitamínů patří mezi klíčové úlohy v oblastech farmacie, potravinářství a výzkumu výživy. Přesné stanovení vitamínu C a vitaminů skupiny B je nezbytné pro kontrolu kvality, dodržení legislativních požadavků a vyhodnocení nutriční hodnoty vzorků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou, citlivou a reprodukovatelnou metodu kapalinové chromatografie (LC) s UV detekcí pro simultánní stanovení deseti vodou rozpustných vitamínů: kyseliny askorbové (vitamín C) a vitaminů skupiny B (niacinu, nikotinamidu, kyseliny pantothenové, pyridoxalu, pyridoxinu, pyridoxaminu, thiaminu, kyseliny listové a riboflavinu).

Použitá metodika a instrumentace

• Kolona: Shim-pack GIST C18, 100 mm × 3,0 mm I.D., částice 3 µm
• Mobilní fáze:
  • A: 10 mM KH₂PO₄ (pH 2,5, upraveno H₃PO₄) + 5 mM IPCC-06
  • B: acetonitril
  • Gradient: 0–8 min A/B = 98/2, 8–13 min A/B = 88/12 (v/v)
• Průtok: 0,6 mL/min
• Teplota kolony: 30 °C
• Detekce: UV při 210 nm
• Injekční objem: 2 µL

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila efektivní oddělení všech deseti vitamínů během přibližně 13 minut. Zaznamenána byla dobrá rozlišitelnost jednotlivých špiček i reprodukovatelnost retenčních časů. Optimalizovaný gradient zajistil vyváženou retenci polárních i méně polárních sloučenin.

Přínosy a praktické využití metody

• Krátká doba analýzy zvyšuje vzorkovou propustnost laboratoře.
• Vysoká citlivost a reprodukovatelnost vhodné pro rutinní QA/QC v farmaceutickém a potravinářském průmyslu.
• Metoda podporuje kontrolu kvality potravinových doplňků a nutričních produktů.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Nasazení hmotnostní spektrometrie (LC-MS) pro zvýšení selektivity a citlivosti.
• Přechod na ultrarychlou kapalinovou chromatografii (UHPLC) pro zkrácení analýzy a snížení spotřeby rozpouštědel.
• Automatizace přípravy vzorků a zpracování dat pro vysokoprůtokové aplikace.
• Využití ekologičtějších mobilních fází (green solvents) a udržitelných postupů.

Závěr

Navržená LC-UV metoda na kolóně Shim-pack GIST C18 prokázala vysokou efektivitu, spolehlivost a univerzálnost pro stanovení vodou rozpustných vitamínů. Díky krátké době analýzy a výborným analytickým parametrům je vhodná pro rutinní i výzkumné nasazení.

Reference

Shimadzu Corporation, ERAS-1000-0223, First Edition: Dec. 2021.