Zafirlukast in Human Plasma Using Retain AX and Accucore RP-MS Column

Význam tématu

Analýza léčiv v biologických matricích je klíčová pro farmakokinetické studie, terapeutické monitorování a zajištění bezpečnosti pacientů. Zafirlukast je antagonista leukotrienových receptorů užívaný k léčbě chronického astmatu, a jeho přesné stanovení v lidské plazmě umožňuje vyhodnotit účinnost dávky a metabolickou biotransformaci.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této aplikace je popsat rychlou, citlivou a reprodukovatelnou metodu pro extrakci a kvantifikaci zafirlukastu z lidské plazmy. Metoda kombinuje polymerní aniontovou výměnnou techniku SPE Retain AX s chromatografií na Accucore RP-MS sloupci za účelem dosažení analytického běhu pod 3 minuty.

Použitá instrumentace

• HPLC systém Thermo Scientific Accela 600 s automatickým vzorkovačem
• Kolonka Accucore RP-MS 2,6 µm, 50 × 2,1 mm a ochranná kolonka 10 × 2,1 mm
• Mass spektrometr Thermo Scientific TSQ Vantage s HESI ionizací
• Retain AX 96-jamková SPE deska s parkovací fází 30 mg

Použitá metodika

Vzorky lidské plazmy byly připraveny pomocí SPE: kondicionace acetonitrilem a vodou, naložení 200 µL plazmy, dvoustupňové promytí vodou a acetonitrilem a eluace acetonitrilem s 5 % kyseliny mravenčí. Extracty byly sušeny, rekonstituovány v LC-MS acetonitrilu a sonikovány. Chromatografie probíhala gradientem vody a methanolu (oba s 0,1 % kyseliny mravenčí) při průtoku 0,6 mL/min, teplotě 25 °C a injekčním objemu 5 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykázala lineární rozsah 50–500 ng/mL s koeficientem r2 0,9903. Recovery zafirlukastu dosáhlo průměrně 85 % a RSD ve QC vzorcích (200 ng/mL) činila 4,2 %. Jednotlivé měření vykazovalo přesnost mezi 100 a 112 %. Chromatogramy ukázaly ostré píky bez zbytkových interferencí a bez carry-over.

Přínosy a praktické využití metody

Popisovaná metoda nabízí značnou úsporu času díky krátké době analýzy, vysokou reprodukovatelnost a jednoduchou automatizovanou přípravu vzorku. Je vhodná pro farmakokinetické studie, terapeutické monitorování a kontrolu kvality léčiv ve výzkumných i klinických laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit o multiplexní stanovení dalších leukotrienových inhibitorů, implementaci ultra-vysokotlaké chromatografie (UHPLC) a plně automatizované systémy pro vyšší propustnost analýz. Pokračující vývoj core-shell částic a ionizačních zdrojů povede ke zvýšení citlivosti a rychlosti měření.

Závěr

Kombinace Retain AX SPE a Accucore RP-MS kolonek poskytuje rychlý, spolehlivý a přesný postup pro kvantifikaci zafirlukastu v lidské plazmě. Metoda splňuje požadavky na linearitu, přesnost a selektivitu pro bioanalytické aplikace.

Reference

1. Drug Information, datum 24.11.2011
2. The Internet Drug Index, datum 24.11.2011
3. FDA Safety Alerts, US Food and Drug Administration, datum 29.11.2011