Determination of Rosuvastatin in Human Plasma by SPE-LC-MS/MS using SOLA and Accucore RP-MS column

Význam tématu

Stanovení rosuvastatinu v lidské plazmě je klíčové pro monitorování účinnosti a bezpečnosti léčby statiny. Díky citlivým bioanalytickým metodám lze přesně sledovat koncentrace léku, vyhodnocovat farmakokinetické parametry a zajišťovat kvalitu péče o pacienty.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou, citlivou a reprodukovatelnou metodu pro kvantifikaci rosuvastatinu v lidské plazmě. K separaci a detekci byla použita kombinace pevné fáze extrakce na formátu 96dstěnné destičky SOLA a chromatografie na kolonce Accucore RP-MS v režimu LC-MS/MS s vyhřívanou elektrosprejovou ionizací a monitoringem v režimu SRM.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorku: 100 µl plazmy, interní standard d6-rosuvastatin 500 ng/ml.
• Extrahční krok: SPE pomocí 96dstěnné destičky SOLA, kondice MeOH a vody, eluace 90 % MeOH, následné vysušení a re‐kondice ve 1:4 MeOH–voda.
• Chromatografie: Accela 600 pumpa a autosampler, kolonka Accucore RP-MS 50×2,1 mm, 2,6 µm, teplota 60 °C, gradient 5–95 % MeOH s formiokyselinou, průtok 0,75 ml/min, doba běhu 3,6 min.
• Detekce: TSQ Vantage triple quadrupole, HESI pozitivní režim, SRM přechody 482,30→258,15 a 488,22→264,17 m/z.

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární rozsah: 1–1000 ng/ml s koeficientem linearity r2 = 0,9984 (1/x vážená regrese).
• LOQ: 1 ng/ml s relativní chybou do 2,4 %.
• Přesnost a přesnost: mezi‐i‐denní i intra‐denní variabilita < 6,1 % a < 5,8 %.
• Recovery: průměrná výtěžnost 99,3 % se RSD 4,9 %.
• Matrix efekt: hodnoty 97,8–105,3 %, bez významného potlačení nebo zvýšení signálu.
• Specifičnost: dostatečný chromatografický rozlišení mezi rosuvastatinem (Tr 1,49 min) a endogenními interferenty (Tr 1,92 min).

Přínosy a praktické využití metody

Navržená procedura kombinuje vysokou rychlost analýzy (≤ 4 min), minimální spotřebu vzorku (100 µl) a rozpouštědel, a současně zajišťuje vynikající citlivost a reprodukovatelnost. Vhodná pro klinické farmakokinetické studie, terapeutické monitorování a vysoce průchodné bioanalytické laboratoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace přípravy vzorků s integrovanými moduly pro SPE.
• Miniaturizace extrakčních formátů a adaptace na microflow chromatografii.
• Mnohoanalytické platformy pro souběžné stanovení více statinů.
• Expanze na monitorování nových léčiv a metabolitů v klinické praxi.

Závěr

Metoda SPE-LC-MS/MS využívající destičky SOLA a kolonu Accucore RP-MS nabízí robustní, rychlý a citlivý postup pro stanovení rosuvastatinu v lidské plazmě. Její vynikající analytické parametry umožňují rutinní nasazení v klinických a farmaceutických laboratořích.

Reference

1. Pelat M., Dessy C., Massion P., Desager J.P., Feron O., Balligand J.L. Journal of Circulation 2003, 107, 2480.
2. Trivedi R.K., Kallem R.R., Mullangi R., Srinivas N.R. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 2005, 39(3-4), 661-669.