Separation of Peptides Using a Core Enhanced Technology Accucore HPLC Column

Význam tématu

Peptidová analýza je klíčová v biochemii, farmaceutickém výzkumu i klinické diagnostice. Rychlé a spolehlivé dělení směsí peptidů s rozdílnou molekulovou hmotností umožňuje detailní charakterizaci a kvantifikaci těchto biologicky aktivních látek.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit schopnost kolony Thermo Scientific Accucore C18 (2.6 µm, 100×2.1 mm) efektivně separovat peptidy s nízkou i vysokou molekulovou hmotností během krátké analýzy pod čtyři minuty.

Použitá metodika

• Vzorek: směs šesti peptidů (50 µg/mL ve vodě)
• Mobilní fáze: A – voda s 0.1 % TFA, B – acetonitril s 0.1 % TFA
• Gradient: lineární od 10 % B (0,01 min) do 70 % B (6,00 min)

Použitá instrumentace

• Kolona: Accucore C18, 2.6 µm, 100×2.1 mm
• HPLC systém: Thermo Scientific Accela HPLC/UHPLC
• Teplota kolony: 40 °C
• Průtok: 0.50 mL/min
• Objem injekce: 2 µL
• Detekce: PDA/UV při 230 nm
• Provozní tlak: ~242 bar

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza prokázala, že kolona dosahuje základní separace peptidů různých molekulových hmotností (238–13 700 Da) v časech retence 0,60–3,23 min. Nízký backpressure a vysoká účinnost dovolují rychlé rozlišení bez ztráty rozlišení mezi nízkomolekulárními a vysokomolekulárními složkami.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá analýza pod 4 minuty šetří čas a zvyšuje propustnost laboratoře
• Vysoká účinnost separace umožňuje přesnou identifikaci a kvantifikaci různých peptidů
• Nízké provozní tlaky snižují opotřebení zařízení a náklady na údržbu

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj fázových materiálů s jemnější kontrolou porozity a velikosti částic, integrace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení selektivity a rozšíření aplikací v proteomice a biofarmaceutické kontrole kvality.

Závěr

Sloupec Accucore C18 s technologií Core Enhanced nabízí optimální kombinaci rychlosti, účinnosti a robustnosti pro separaci peptidů v analytických laboratořích, čímž podporuje efektivní a spolehlivé biochemické analýzy.