Thermo Scientific Accucore HPLC Columns for Biomolecule Separations

Význam tématu

Analytické dělení biomolekul, zejména peptidů a proteinů, je klíčové pro biochemický výzkum, klinickou diagnostiku i průmyslovou kontrolu kvality. Pokrok ve vývoji chromatografických náplní přináší rychlejší separace s vyšší rozlišovací schopností, nižším tlakem a lepší dlouhodobou stabilitou kolon. Thermo Scientific Accucore HPLC kolony se 150 Å pórovitostí a Core Enhanced Technology nabízejí optimální kompromis mezi účinností a provozními náklady.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem materiálu je představit vlastnosti a výhody Accucore HPLC kolon určených pro bioanalytické aplikace. Prezentuje technologické principy pevných jader, kontrolu velikosti částic a pokročilé chemické zakončení fáze, popisuje dostupné formáty kolon (analytické, mikro, nano) a ukazuje výkon pro separaci peptidů i intactních proteinů.

Použitá metodika a instrumentace

Pro hodnocení propriet Accucore kolon byly provedeny chromatografické analýzy peptidů a proteinových standardů za různých podmínek:

• Fáze: C18 a C4 na 2,6 µm tuhém jádru s 150 Å pórovitostí
• Formáty: 2,1 mm ID, 3,0 mm ID, 4,6 mm ID a nanoViper 75 µm
• Mobilní fáze: 0,1 % TFA nebo formiová kyselina v aketonitrilu/vodě
• Proudění: 300–1800 µl/min (nano 300 nl/min)
• Teplotní řízení: 35–70 °C
• Detekce: UV (214, 220, 280 nm) a MS na Orbitrapu

Hlavní výsledky a diskuse

Testy ukázaly:

• Špičková rozlišovací schopnost: Accucore 150-C18 vykazuje oproti konvenčním 80 Å kolonám výrazně ostřejší a symetričtější píky.
• Vysoká kapacita špiček: Díky užším píkům dosahuje až dvojnásobné peak capacity pro peptide.
• Nižší tlak: Pevné jádro 2,6 µm generuje tlak o 50 % nižší než sub-2 µm částice při srovnatelné účinnosti.
• Reprodukovatelnost: Retenční časy RSD <0,2 % a stabilní asymetrie píku.
• Vysoká gramáž: Při náběhu až do 2–5 µg peptidů (nebo desítek pmol proteinů) zůstávají píky ostré a peak capacity klesá jen pozvolně.

Přínosy a praktické využití metody

Accucore kolony umožňují:

• Rychlé bio-LC metody pro proteomiku a peptidomiku.
• Citlivé analýzy intactních proteinů i jejich modifikací.
• Nižší provozní náklady díky delší životnosti a nižším tlakům.
• Jednoduchou interoperabilitu s běžnými HPLC a nanoLC systémy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se:

• Dálší integrace s vysoce výkonnou kapalinovou chromatografií (UPLC) a MS detektory.
• Rozšíření pevných jader do dalších materiálů (např. polymerní jádra) a povrchových modifikací pro zlepšení selektivity.
• Optimalizace pro víceúrovňové proteomické workflow v klinických laboratořích.

Závěr

Thermo Scientific Accucore HPLC kolony s 150 Å pevným jádrem a Core Enhanced Technology představují vysoce efektivní, rychlou a robustní platformu pro bioanalytické separace. Kombinace vynikajícího rozlišení, nízkého tlaku a dlouhé životnosti je významným krokem pro moderní proteomickou a proteinovou analýzu.

Reference

V textu nebyly uvedeny žádné specifické literární zdroje.