Quantification of eight antimycotics in human plasma by liquid chromatography-tandem mass spectrometry for clinical research
Aplikace | 2021 | Thermo Fisher ScientificInstrumentace
Antimykotika mají úzký terapeutický index a proměnlivou farmakokinetiku, proto je jejich přesná kvantifikace v plazmě nezbytná pro optimální léčebné řízení pacientů. Tradiční HPLC metody vyžadují složité extrakční postupy, zatímco moderní LC–MS/MS přináší vyšší selektivitu a zkrácení doby analýzy.
Práce si klade za cíl vyvinout a validovat rychlou a citlivou metodu pro simultánní stanovení osmi antimykotik v lidské plazmě v čase 3,6 minuty. Studie zkoumá linearitu, LLOQ, přesnost, opakovatelnost i mezidenní variabilitu metody.
Vzorek plazmy (50 µl) byl deproteinován acetonitrilem s vnitřními standardy, poté byl supernatant naředěn a injektován do UHPLC. Chromatografie probíhala na kolóně Hypersil GOLD (50×2,1 mm, 1,9 µm) gradientem vody/formiové kyseliny a acetonitrilu/formiové kyseliny. MS detekce byla realizována v SRM režimu za použití HESI v pozitivním módu.
Metoda prokázala lineární odezvu (1/x vážení) s biasem kalibrátorů do ±6 %. LLOQ pro jednotlivé látky se pohybovaly od 0,0138 do 0,245 mg/l. Intradení i mezidenní přesnost byla <12,4 % CV, bias kontrolních vzorků se pohyboval mezi –5,5 % a 5,1 %. Nebyl zaznamenán žádný carryover.
Metoda lze dále rozšířit o další léčiva či jejich metabolity, zavést plně automatizovanou přípravu vzorků nebo on-line extrakci. Potenciál spočívá v aplikacích v personalizované medicíně a ve výzkumu rezistence k antimykotikům.
Vyvinutá LC–MS/MS metoda splňuje požadavky na rychlost, přesnost a citlivost pro kvantifikaci osmi antimykotik v plazmě a je vhodná pro výzkumné klinické aplikace.
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceThermo Fisher Scientific, RECIPE
Souhrn
Význam tématu
Antimykotika mají úzký terapeutický index a proměnlivou farmakokinetiku, proto je jejich přesná kvantifikace v plazmě nezbytná pro optimální léčebné řízení pacientů. Tradiční HPLC metody vyžadují složité extrakční postupy, zatímco moderní LC–MS/MS přináší vyšší selektivitu a zkrácení doby analýzy.
Cíle a přehled studie
Práce si klade za cíl vyvinout a validovat rychlou a citlivou metodu pro simultánní stanovení osmi antimykotik v lidské plazmě v čase 3,6 minuty. Studie zkoumá linearitu, LLOQ, přesnost, opakovatelnost i mezidenní variabilitu metody.
Metodika
Vzorek plazmy (50 µl) byl deproteinován acetonitrilem s vnitřními standardy, poté byl supernatant naředěn a injektován do UHPLC. Chromatografie probíhala na kolóně Hypersil GOLD (50×2,1 mm, 1,9 µm) gradientem vody/formiové kyseliny a acetonitrilu/formiové kyseliny. MS detekce byla realizována v SRM režimu za použití HESI v pozitivním módu.
Použitá instrumentace
- UHPLC systém Thermo Scientific Vanquish Flex Binary
- Triple kvadrupólový MS Thermo Scientific TSQ Quantis
- Kolona Hypersil GOLD 50×2,1 mm, 1,9 µm
- Zdroj HESI pro pozitivní ionizaci
- Softwarové zpracování TraceFinder 5.1
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda prokázala lineární odezvu (1/x vážení) s biasem kalibrátorů do ±6 %. LLOQ pro jednotlivé látky se pohybovaly od 0,0138 do 0,245 mg/l. Intradení i mezidenní přesnost byla <12,4 % CV, bias kontrolních vzorků se pohyboval mezi –5,5 % a 5,1 %. Nebyl zaznamenán žádný carryover.
Přínosy a praktické využití metody
- Rychlá analýza osmi antimykotik za méně než 4 minuty
- Jednoduchá offline proteinová precipitace
- Vysoká citlivost a selektivita díky SRM detekci
- Vhodné pro klinické farmakokinetické studie a TDM
Budoucí trendy a možnosti využití
Metoda lze dále rozšířit o další léčiva či jejich metabolity, zavést plně automatizovanou přípravu vzorků nebo on-line extrakci. Potenciál spočívá v aplikacích v personalizované medicíně a ve výzkumu rezistence k antimykotikům.
Závěr
Vyvinutá LC–MS/MS metoda splňuje požadavky na rychlost, přesnost a citlivost pro kvantifikaci osmi antimykotik v plazmě a je vhodná pro výzkumné klinické aplikace.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Quantification of eight antimycotics in human plasma using an Orbitrap Exploris 120 high-resolution accurate mass mass spectrometer for clinical research
2021|Thermo Fisher Scientific|Aplikace
TECHNICAL NOTE 66064 Quantification of eight antimycotics in human plasma using an Orbitrap Exploris 120 high-resolution accurate mass mass spectrometer for clinical research Authors: Gaëtan Renoulin1, Claudio De Nardi2 Thermo Fisher Scientific, Les Ulis, France 1 Thermo Fisher Scientific, Reinach,…
Klíčová slova
level, levelitraconazole, itraconazoleantimycotics, antimycoticsisavuconazole, isavuconazoleposaconazole, posaconazolevoriconazole, voriconazoleketoconazole, ketoconazolefluconazole, fluconazoleclinmass, clinmassaverage, averagearb, arbcalculated, calculatedname, nameconcentration, concentrationeight
Quantification of eight antimycotics in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research
2021|Thermo Fisher Scientific|Aplikace
TECHNICAL NOTE 66046 Quantification of eight antimycotics in human plasma by LC-HRAM-MS for clinical research Authors: Gaëtan Renoulin1, Mariana Barcenas1, Claudio De Nardi2 Thermo Fisher Scientific, Les Ulis, France 1 Thermo Fisher Scientific, Reinach, Switzerland 2 Keywords: Orbitrap Exploris 120…
Klíčová slova
level, levelitraconazole, itraconazoleantimycotics, antimycoticsisavuconazole, isavuconazoleposaconazole, posaconazolevoriconazole, voriconazoleketoconazole, ketoconazolefluconazole, fluconazoleaverage, averagecalculated, calculatedconcentration, concentrationbias, biasnominal, nominalarb, arbeight
Quantification of nine antimycotic drugs in human plasma or serum by LC-HRAM(MS) for clinical research
2021|Thermo Fisher Scientific|Aplikace
TECHNICAL NOTE 73904 Quantification of nine antimycotic drugs in human plasma or serum by LC-HRAM(MS) for clinical research Authors: Claudio De Nardi1, Katharina Kern2, Steffen Peters2 Thermo Fisher Scientific GmbH, Dreieich, Germany 2 RECIPE Chemicals + Instruments GmbH, Munich, Germany…
Klíčová slova
itraconazole, itraconazolecalculated, calculatedanidulafungin, anidulafunginconcentration, concentrationaverage, averageisavuconazole, isavuconazoleposaconazole, posaconazoleantimycotic, antimycoticvoriconazole, voriconazolebias, biasketoconazole, ketoconazolefluconazole, fluconazoleantimycotics, antimycoticsnominal, nominalclinmass
Quantification of antimycotics in human plasma or serum by liquid chromatography-tandem mass spectrometry for clinical research
2018|Thermo Fisher Scientific|Aplikace
TECHNICAL NOTE 65149 Quantification of antimycotics in human plasma or serum by liquid chromatography-tandem mass spectrometry for clinical research Authors Claudio De Nardi, Thermo Fisher Scientific GmbH, Dreieich, Germany Sergio Indelicato, Thermo Fisher Scientific, Les Ulis, France Keywords Antimycotics, offline…
Klíčová slova
antimycotics, antimycoticshydroxyitraconazole, hydroxyitraconazoleconcentration, concentrationaverage, averageisavuconazole, isavuconazolecalculated, calculatedposaconazole, posaconazoleitraconazole, itraconazolevoriconazole, voriconazoleketoconazole, ketoconazolefluconazole, fluconazolebias, biasclinmass, clinmassquantis, quantisnominal
