Analysis of vitamin D in cheese by APCI LC-MS/MS using the Bruker EVOQ™ LC-TQ Elite mass spectrometry system

Význam tématu

Vitamin D je nezbytný liposolubilní vitamín, který reguluje homeostázu vápníku a mineralizaci kostí. Přesné stanovení vitaminu D v obohacených potravinách, zejména v sýrech, je klíčové pro zajištění bezpečného příjmu a dodržení legislativních limitů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo vyvinout rychlou, jednoduchou a robustní LC-MS/MS metodu se zdrojem APCI pro kvantifikaci vitaminu D2 a D3 v sýrech. Metoda má splňovat kritéria ISO 17025, nabízet vysokou citlivost a přesnost a být připravena k rutinní implementaci v laboratořích potravinářské kontroly.

Použitá metodika

Vzorek sýra (10 g) se homogenizoval, saponifikoval KOH a pyrogallolem, následně extrahoval šesti destilovaným n-hexanem s BHT. Extrakt se odpařil, rekonstituoval v acetonitril/voda (70/30) a filtroval přes 0,45 µm PTFE filtr.

Použitá instrumentace

MS/MS systém: Bruker EVOQ™ LC-TQ Elite s APCI (250 °C, 100 µA, Ar 2,0 mtorr) v režimu EDR. UHPLC: Bruker Elute™ s kolonkou Intensity Solo C18 100×2,1 mm, mobilní fáze voda/methanol s 0,1 % kyseliny mravenčí, průtok 400 µL/min, teplota 35 °C, gradientní běh 9 minut. Software: Hystar 4.1, Bruker MSWS 8.2.1, TASQ 1.4.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykázala v rozsahu 0,5–1000 µg/kg lineární kalibraci (R² > 0,999, RSD < 25 %). Limit kvantifikace (LOQ) byl 0,5 µg/kg, limit detekce (LOD) < 0,1 µg/kg. Opakovatelnost (RSD) byla < 3,5 % a recovery spojené s precisností dosahovaly 90–95 %, což potvrzuje vysokou přesnost a spolehlivost výsledků.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda přináší selektivní a citlivou analýzu vitaminu D v potravinách. Díky krátkému době analýzy, nízkým detekčním limitům a splnění norem ISO 17025 je vhodná pro rutinní kontrolu obohacených potravin, včetně dětských přípravků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit na další maticové typy (např. kojenecká výživa), zapojit do multiplexních analýz více vitamínů a adaptovat na vysokoprůtokové screeningové systémy. S příchodem nových ionizačních technik se očekává další zvýšení citlivosti a robustnosti.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda s APCI zdrojem je rychlá, citlivá a přesná. Splňuje požadavky na rutinní analýzu vitaminu D v obohacených sýrech a je připravena k implementaci v kontrolních laboratořích k zajištění bezpečného příjmu vitamínu D.

Reference

• MPI Technical Paper No. 2014/03, New Zealand Government.
• von Hurst PR, Stonehouse W, Coad J. Vitamin D supplementation reduces insulin resistance in South Asian women living in New Zealand who are insulin resistant and vitamin D deficient. Br J Nutr. 2010;103(4):549–555.
• Verkaik-Kloosterman J, Seves SM, Ocké MC. Vitamin D concentrations in fortified foods and dietary supplements intended for infants: Implications for vitamin D intake. Food Chem. 2017;221:629–635.
• EFSA Journal. Dietary reference values for vitamin D. 2016;14(10):4547.
• Martin R, van´t Slot G. Online Analysis of 25-OH-Vitamin D2/D3 in Plasma and Serum with the EVOQ LC-Triple Quad. Bruker Application Note LCMS-103; 2015.
• EFSA Journal. Tolerable Upper Intake Level of vitamin D. 2012;10(7):2813.