UPLC/MS/MS Determination of Aminoglycoside Antibiotics in Meat and Milk

Význam tématu

Analýza reziduí aminoglycosidových antibiotik v mase a mléce je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravin a dodržení maximálních limitů reziduí stanovených regulačními orgány. Tato skupina antibiotik představuje analytickou výzvu díky nízké afinitě k běžným organickým rozpouštědlům a potenciálním interferencím z matrice.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou a citlivou metodiku pro stanovení aminoglycosidů v bovinním mase a mléce na úrovni jednotek ppb pomocí UPLC/MS/MS. Metoda vychází z extraakce v kyselém akvózním prostředí, následného SPE čištění a iontově párkové chromatografie.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky masa (2 g homogenizované tkáně) a mléka (10 mL) byly extrahovány 20 mL pufru obsahujícího trichloroctovou kyselinu pro precipitaci bílkovin. Po odstředění a úpravě pH proběhlo SPE čištění na Oasis HLB sorbentu s vodným eluentem a formiátovou eluční směsí.

Použitá instrumentace:

• ACQUITY UPLC System
• ACQUITY TQD Mass Spectrometer
• ACQUITY UPLC HSS PFP Column (2.1×100 mm, 1.7 µm)
• Oasis HLB Cartridge/96-well Plate
• Polypropylene Vials

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla LOQ 10 ppb pro mléko a 50 ppb pro maso s poměrem signál-šum >100:1. Obnovení analytů se pohybovalo mezi 75–103 % při RSD <14 %. Interferenční účinky matrice byly <12 % u mléka a <30 % u masa. Iontově párková chromatografie s 20 mM heptafluorobutyrátovou kyselinou (HFBA) přinesla ostré píky a kompatibilitu s MS detekcí. Režim HILIC byl prověřen, avšak vykazoval širší píky a vyžadoval organický ředicí pufr.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé čištění a analýzu až 20 vzorků denně jedním operátorem, splňuje požadavky na kontrolu reziduí aminoglycosidů v potravinách a je vhodná pro laboratoře QA/QC i výzkumná pracoviště.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat adaptaci na širší spektrum matric, automatizaci přípravy vzorků, integraci s vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrií a rozšíření screeningových panelů o další farmakologicky aktivní látky.

Závěr

Vyvinutá UPLC/MS/MS metoda s iontově párkovou reverzní fází a SPE očistou poskytuje spolehlivou, citlivou a reprodukovatelnou analýzu aminoglycosidových antibiotik v mase a mléce na úrovni ppb.

Reference

1. United States Department of Agriculture Food Safety and Inspection Service. Screening and Confirmation for Aminoglycosides by UHPLC-MS-MS.
2. Plozza T, Trenerry VC, Zeglinski P, Nguyen H, Johnstone P. The Confirmation and Quantification of Selected Aminoglycoside Residues in Animal Tissue and Bovine Milk by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry. International Food and Research Journal. 2011;18(3):1077-1084.