Sensitive and Fast Measurement of Aminoglycoside Antibiotics in Milk, Meat or Eggs by HILIC-MS/MS and Identification using MRM Spectrum Mode

Význam tématu

Metoda citlivé a rychlé analýzy aminoglykosidových antibiotik v potravinách živočišného původu je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravin a ochranu veřejného zdraví. Regulace limitů reziduí (MRL) vyžaduje spolehlivou kvantifikaci i identifikaci v různých matricích, jako je mléko, maso nebo vejce.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout univerzální HILIC-MS/MS metodu pro screening a potvrzení přítomnosti 15 aminoglykosidů s dosažením kvantifikačních limitů na úrovni femtogramů na kolonu. Metoda má pokrýt různé druhy potravin a mezinárodní limity MRL.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky (5 g masa, 10 mL mléka nebo vejce) byly extrahovány v roztoku NH4OAc/EDTA/TCA, poté očištěny SPE (WCX Express, Biotage) a ředěny formiokyselinou před injekcí.

• Chromatografie: HILIC na koloně Inertsil Amide (100×2,1 mm, 3 µm) při 50 °C, gradient od 80 % do 30 % acetonitrilu, průtok 800 µL/min.
• Detekce: LCMS-8060 s heated-ESI, pozitivní ionizace, MRM režim.
• Screening: 2 MRM tranzice na spojka, doba analýzy 3,5 min.
• Potvrzení: MRM Spectrum Mode s 15 tranzicemi, doba analýzy 11 min.

Hlavní výsledky a diskuse

Kvantifikační limity metody odpovídají nebo převyšují požadavky MRL v Evropě, USA a Japonsku. Kalibrace byla nastavena od 0,5× MRL/10 až do 1,5× MRL, což umožňuje široké pokrytí. Recoverie ve 12 typech reálných vzorků se pohybovaly mezi 80 %–110 % s RSD < 14 %, bez významného matrix efektu. MRM Spectrum Mode poskytuje jednoznačnou identifikaci srovnatelnou citlivostí jako kvantitativní screening.

Přínosy a praktické využití metody

Univerzální workflow eliminuje potřebu iontových párů, zjednodušuje validaci více metod na jednom přístroji a šetří čas díky rychlým otočkám kolony. Metoda je vhodná pro rutinní laboratoře potravinové kontroly.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj ultrarychlých a vysoce citlivých hmotnostních spektrometrů a pokročilých režimů akvizice (např. MRM Spectrum) otevírá cestu k analýze dalších polárních látek. Dále se očekává širší aplikace v automatizovaných platformách s vyšší propustností.

Závěr

Vyvinutá HILIC-MS/MS metoda umožňuje rychlý a spolehlivý screening i potvrzení aminoglykosidů v různých potravinářských matricích. Dosahuje nízkých kvantifikačních limitů, vysokých recoverií a robustní identifikace, což podporuje dodržování mezinárodních norem.

Reference

V textu nebyly uvedeny specifické referenční publikace.