Method Transfer from an Agilent 1100 Series LC System to an ACQUITY UPLC H-Class System with Gradient SmartStart Technology: Analysis of an Active Pharmaceutical Ingredient and Related Substances

Význam tématu

Analýza aktivních farmaceutických látek a jejich příbuzných sloučenin pomocí HPLC/UHPLC je klíčová pro zajištění kvality, bezpečnosti a účinnosti léčiv během celého životního cyklu. Přenos existujících metod z HPLC na moderní UHPLC systémy snižuje dobu analýz, zvyšuje propustnost a podporuje technologickou obnovu laboratoří.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřuje na přenos reverzně-fázové gradientní metody pro analýzu abacaviru a příbuzných látek z Agilent 1100 Series LC na ACQUITY UPLC H-Class systém. Hlavním cílem bylo zachovat kvalitu separace a splnit systémové požadavky bez nutnosti rozsáhlé revalidace metody.

Použitá metodika a instrumentace

Gradientní separace využívá CORTECS C18 kolonu (2,7 µm, 4,6×75 mm) s pasivním (Agilent) a aktivním (UPLC) předohřevem mobilní fáze. Dwell volume každého systému bylo naměřeno a rozdíl 915 µL byl zadán do metody pomocí technologie Gradient SmartStart, která automaticky kompenzuje zpoždění gradientu.
Použité moduly:

• Agilent 1100 Series: degasser G1322A, quaternary pump G1311A, autosampler G1313A, column compartment G1316A, DAD detector G1315B
• ACQUITY UPLC H-Class: quaternary solvent manager 186015018, sample manager FTN 186015017, column heater CH-A 186015042, PDA detector 186015032
• Chromatography Data System: Empower3 FR2

Hlavní výsledky a diskuse

Retention time pro všechny analyty se lišily méně než o 3 % mezi systémy a relativní retenční časy se pohybovaly v odchylce do 0,01 %. Kritická dvojice dosáhla USP rozlišení ≥2,5 na obou přístrojích. Repeatabilita (n=5) potvrdila RSD <0,2 % pro retenční časy a <3 % pro plošné výskyty, přičemž UPLC systém vykázal nižší variabilitu plošných integrálů. Technologie Gradient SmartStart odstranila potřebu ruční úpravy gradientu.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlý a regulacím odpovídající přenos starších HPLC analýz na moderní UHPLC platformy bez rozsáhlé revalidace. Zvyšuje produktivitu laboratoří, zachovává vysoké rozlišení a zlepšuje opakovatelnost výsledků.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Širší aplikace Gradient SmartStart pro automatizovaný přenos dalších komerčních a kompendiálních metod
• Integrace s AI nástroji pro optimalizaci gradientu a analýzu dat
• Další miniaturizace a zvýšení propustnosti v QC laboratořích farmaceutického průmyslu
• Rozšíření na jiné chromatografické techniky a příslušenství

Závěr

Přenos metody pro analýzu abacaviru a příbuzných látek z Agilent 1100 Series LC na ACQUITY UPLC H-Class byl úspěšný. Zachována byla kvalita separace, opakovatelnost a systémová kompatibilita, přičemž technologie Gradient SmartStart výrazně zjednodušila proces přenosu bez manuálních úprav.

Reference

• Chapter <621> CHROMATOGRAPHY. United States Pharmacopeia and National Formulary (USP 37-NF 32 S2). Baltimore, MD: United Book Press; 2014.
• Waters Corporation. CORTECS Columns Applications Notebook. Milford, MA: Waters Corporation; 2013.
• Protocol for Gradient Delay (Dwell Volume) Measurement. Application Notebook: Waters Corporation; 2013.
• Gradient SmartStart Technology. ACQUITY UPLC H-Class System Guide Revision B. Waters Corporation; 2010.
• Dolan JW. System Suitability. LC•GC Europe. 2004;17(6).
• Frequently Asked Questions, Chromatography. U.S. Pharmacopeial Convention; [cited 2014].
• Easy Transfer of Standard HPLC Methods to the Agilent 1200 Series Rapid Resolution System. Agilent Technologies; 2006.