Transferring an HPLC Method for Related Substances from Different LC Platforms to an ACQUITY Arc System

Význam tématu

Transfekce chromatografických metod mezi různými LC platformami je zásadní pro zajištění konzistentních výsledků napříč laboratořemi a zařízeními různých výrobců. Umožňuje rychlejší nasazení zavedených postupů v novém prostředí bez náročné revalidace a minimalizuje odstávky výrobních a kontrolních procesů.

Cíle a přehled studie / článku

Studie popisuje přenos HPLC metody pro stanovení souvisejících látek metoklopramidu HCl z Agilent 1100, Agilent 1260 a Alliance systémů na ACQUITY Arc System. Dále demonstruje vylepšení metody škálováním na sloupce s menšími částicemi (3,5 µm a 2,5 µm) za účelem zkrácení doby analýzy a úspory spotřeby rozpouštědel.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda: gradientní HPLC separace devíti analytů (API a 8 nečistot) podle USP specifikací.
Rozpouštědla: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě (A) a v methanolu (B).
Škálování: geometrická úprava průtoku, objemu injekce a gradientních časů podle poměru délka/velikost částic.

Použitá instrumentace

• Agilent 1100 Series LC System s kvaternárním čerpadlem a DAD detektorem
• Agilent 1260 Infinity Quaternary LC System s nízkodisperzním výměníkem a DAD detektorem
• Alliance HPLC System s 2998 PDA detektorem
• Waters ACQUITY Arc System s Arc Multi-flow path technologií, pasivním předehřívačem
• ACQUITY QDa Detector (ESI+, ESI–)
• Empower 3 Chromatography Data Software
• Sloupce XSelect CSH C18 (4,6×150 mm 5 µm; 3,0×100 mm 3,5 µm; 3,0×75 mm 2,5 µm)

Hlavní výsledky a diskuse

1) Přenos metody na ACQUITY Arc System pomocí výběru fluidického okruhu (path 1) reprodukoval chromatogramy z Agilent a Alliance systémů srovnatelnou rozlišovací schopností a tvarem píků.
2) Systémová příprava (5násobné injekce standardu) na ACQUITY Arc splňovala USP kritéria pro rozlišení (API vs. Impurity A ≥ 3,0), tailing faktory (< 1,5) a opakovatelnost retenčních časů a ploch (< 2 % RSD).
3) Škálováním na 3,5 µm sloupec se doba analýzy zkrátila o ~33 % (15→10 min), spotřeba rozpouštědla klesla o 72 %.
4) Další škálování na 2,5 µm sloupec zkrátilo běh o 50 % (15→7,5 min) a spotřebu rozpouštědel o 79 %, přičemž se udržely chromatografické parametry a systémová vhodnost.

Přínosy a praktické využití metody

• Snadný přenos a replikace existujících metod bez úprav gradientní tabulky
• Rychlá identifikace píků pomocí hmotnostní detekce QDa
• Flexibilní nasazení ve farmaceutických a kontraktních laboratořích
• Zvýšení propustnosti analytického workflow při zachování kvality separace

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace Multi-flow path technologií pro automatickou kompenzaci objemů v různých systémech.
• Další miniaturizace a zkracování analytických metod s využitím sub-2 µm částic a UPLC.
• Rozšíření hmotnostní detekce o kvantitativní stanovení nečistot v reálném čase.
• Implementace pokročilých softwarových nástrojů pro automatizované převody metod mezi platformami.

Závěr

ACQUITY Arc System prokázal schopnost bezproblémově převést HPLC metodu souvisejících látek metoklopramidu HCl z různých LC platforem a dále ji optimalizovat pro vyšší efektivitu. Kombinace Arc Multi-flow path technologie a QDa detektoru poskytuje konzistentní výsledky bez nutnosti nových validací a umožňuje výrazné zkrácení analýz a úsporu zdrojů.

Reference

1. Jones MD, Alden P, Fountain KJ, Aubin A. Implementation of Methods Translation between Liquid Chromatography Instrumentation. Waters Corp. 2010;720003721en.
2. The United States Pharmacopeia Convention. USP Monograph Metoclopramide Hydrochloride USP38–NF33; August 2015.
3. The United States Pharmacopeia Convention. USP General Chapter <621> Chromatography USP38–NF33; August 2015.