ProteinWorks - TAKE THE COMPLEXITY OUT OF LARGE MOLECULE QUANTIFICATION
Brožury a specifikace | 2016 | WatersInstrumentace
Analýza velkých biomolekul, zejména protilátek, je klíčová v preklinickém výzkumu i vývoji léčiv. Přesné a citlivé stanovení proteinů v biologických matricích (plazma, sérum) podporuje rozhodování ve farmaceutické vývojové fázi a zajišťuje kvalitu a porovnatelnost výsledků mezi laboratořemi.
Článek popisuje komplexní řešení ProteinWorks™ pro přípravu vzorků a LC-MS kvantifikaci proteinů pomocí surrogate peptidového přístupu. Hlavním cílem je demonstrovat standardizovanou, reprodukovatelnou a flexibilní metodu s vysokou citlivostí pro sledování monoklonálních protilátek v plazmě.
Metoda kombinuje předem odvážené reagencie a standardizované protokoly: eXpress Digest kity pro rychlý enzymatický rozklad, µElution SPE pro očistu peptidů a Intact mAb Check jako kontrolní standard. Čištění následuje SPE krok, po kterém se analyzují signature peptidy na LC-MS platformě.
Klíčová instrumentace:
Reprodukovatelnost intra- i inter-kit pro monoklonální protilátky (bevacizumab, infliximab, trastuzumab, adalimumab) dosahuje jednomístných %CV.
Metoda dokáže kvantifikovat infliximab až do 10 ng/mL v plazmě potkana s vysokým poměrem signál/šum. Standardní křivky ve frekvencích vzorků 15, 35 a 70 µL vykazují lineární oblast (r2 ≥ 0,994) a přesnost okolo 100 %.
ProteinWorks soupravy snižují zdroj variability díky předem odměřeným reagenciím a jasným postupům. Laboratoře tak mohou rychle přenášet metodu mezi analytiky, pobočkami i CRO. Metoda je vhodná pro výzkum, vývoj biologik a regulované laboratoře zaměřené na QA/QC.
Můžete očekávat další rozšíření na multiplexní analýzy, automatizaci na robotických platformách a integraci s datovými platformami pro vysokoprůtokové bioanalytické workflow. Další oblastí rozvoje bude rozšiřování repertoáru surrogate peptidů a validace pro nové biologické látky.
ProteinWorks představuje robustní řešení pro kvantifikaci velkých molekul, které kombinuje citlivost, reprodukovatelnost a flexibilitu. Standardizované sady kitů a předpřipravené protokoly umožňují rychlý přenos metod a spolehlivé výsledky v různých prostředích.
TECHNOLOGY BRIEF 720005570EN
APPLICATION NOTE 720005535EN
TECHNOLOGY BRIEF 720005575EN
Spotřební materiál
ZaměřeníProteomika
VýrobceWaters
Souhrn
Význam tématu
Analýza velkých biomolekul, zejména protilátek, je klíčová v preklinickém výzkumu i vývoji léčiv. Přesné a citlivé stanovení proteinů v biologických matricích (plazma, sérum) podporuje rozhodování ve farmaceutické vývojové fázi a zajišťuje kvalitu a porovnatelnost výsledků mezi laboratořemi.
Cíle a přehled článku
Článek popisuje komplexní řešení ProteinWorks™ pro přípravu vzorků a LC-MS kvantifikaci proteinů pomocí surrogate peptidového přístupu. Hlavním cílem je demonstrovat standardizovanou, reprodukovatelnou a flexibilní metodu s vysokou citlivostí pro sledování monoklonálních protilátek v plazmě.
Použitá metodika a instrumentace
Metoda kombinuje předem odvážené reagencie a standardizované protokoly: eXpress Digest kity pro rychlý enzymatický rozklad, µElution SPE pro očistu peptidů a Intact mAb Check jako kontrolní standard. Čištění následuje SPE krok, po kterém se analyzují signature peptidy na LC-MS platformě.
Klíčová instrumentace:
- ACQUITY UPLC s kolonkou Peptide BEH C18 (300 Å, 1,7 µm, 2,1×150 mm)
- Pozitivně tlakový 96-kanálový procesor a vakuová SPE vakuová destička
- Modulární termoblok pro 1 mL zkumavky
- 96-well destičky a uzávěry pro vzorky
Hlavní výsledky a diskuse
Reprodukovatelnost intra- i inter-kit pro monoklonální protilátky (bevacizumab, infliximab, trastuzumab, adalimumab) dosahuje jednomístných %CV.
Metoda dokáže kvantifikovat infliximab až do 10 ng/mL v plazmě potkana s vysokým poměrem signál/šum. Standardní křivky ve frekvencích vzorků 15, 35 a 70 µL vykazují lineární oblast (r2 ≥ 0,994) a přesnost okolo 100 %.
Přínosy a praktické využití metody
ProteinWorks soupravy snižují zdroj variability díky předem odměřeným reagenciím a jasným postupům. Laboratoře tak mohou rychle přenášet metodu mezi analytiky, pobočkami i CRO. Metoda je vhodná pro výzkum, vývoj biologik a regulované laboratoře zaměřené na QA/QC.
Budoucí trendy a možnosti využití
Můžete očekávat další rozšíření na multiplexní analýzy, automatizaci na robotických platformách a integraci s datovými platformami pro vysokoprůtokové bioanalytické workflow. Další oblastí rozvoje bude rozšiřování repertoáru surrogate peptidů a validace pro nové biologické látky.
Závěr
ProteinWorks představuje robustní řešení pro kvantifikaci velkých molekul, které kombinuje citlivost, reprodukovatelnost a flexibilitu. Standardizované sady kitů a předpřipravené protokoly umožňují rychlý přenos metod a spolehlivé výsledky v různých prostředích.
Reference
TECHNOLOGY BRIEF 720005570EN
APPLICATION NOTE 720005535EN
TECHNOLOGY BRIEF 720005575EN
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Waters Application Notes - ProteinWorks
2016|Waters|Příručky
Waters Application Notes ProteinWorks OUR SCIENTISTS Erin E. Chambers As a principal scientist, Erin has been working almost exclusively on peptide and protein bioanalysis for the last seven years, while managing small and large molecule bioanalysis and clinical research applications…
Klíčová slova
proteinworks, proteinworksdigest, digestexpress, expressarea, areapeptide, peptidekit, kittrastuzumab, trastuzumabgeneric, genericplasma, plasmaftfsldtsk, ftfsldtskdigestion, digestionmurine, murineantibody, antibodyprotein, proteindstyslsstltlsk
Single Digit Reproducibility Using ProteinWorks eXpress Digest Kits
2016|Waters|Technické články
Single Digit Reproducibility Using ProteinWorks eXpress Digest Kits Mary Lame, Paula Orens, Sherri Naughton, and Erin Chambers Waters Corporation, Milford, MA, USA G OA L Protein quantification workflows are not only time To demonstrate the high reproducibility of ProteinWorks™ eXpress…
Klíčová slova
avastin, avastinkit, kitproteinworks, proteinworksftfsldtsk, ftfsldtskdstyslsstltlsk, dstyslsstltlskgpsvfplapssk, gpsvfplapsskexpress, expressdigest, digeststaylqmnslr, staylqmnslrinter, interreproducibility, reproducibilityaffinity, affinityintra, intravvsvltvlhqdwlngk, vvsvltvlhqdwlngkpeptide
Simple, Standardized, and Sensitive Quantification of Bevacizumab (Avastin) Using ProteinWorks eXpress Digest Kits
2016|Waters|Aplikace
Simple, Standardized, and Sensitive Quantification of Bevacizumab (Avastin) Using ProteinWorks eXpress Digest Kits Mary Lame, Hua Yang, Sherri Naughton, and Erin Chambers Waters Corporation, Milford, MA, USA A P P L I C AT I O N B E N…
Klíčová slova
height, heightftfsldtsk, ftfsldtskpeptide, peptideproteinworks, proteinworksbevacizumab, bevacizumabsignature, signaturedstyslsstltlsk, dstyslsstltlskdigest, digestexpress, expressunique, uniqueconc, concmean, meanstaylqmnslr, staylqmnslrrat, rataccuracy
Antibody Quantification Using ProteinWorks eXpress Digest Kits and Multiple Plasma Volumes
2016|Waters|Aplikace
Antibody Quantification Using ProteinWorks eXpress Digest Kits and Multiple Plasma Volumes Paula Orens, Mary Lame, Sherri Naughton, and Erin Chambers Waters Corporation, Milford, MA, USA G OA L Recently there has been a trend towards LC-MS To demonstrate the broad…
Klíčová slova
area, areaplasma, plasmadigest, digestproteinworks, proteinworksexpress, expressvolumes, volumesinfliximab, infliximabdirect, directdilltqspailsvspger, dilltqspailsvspgerdigestion, digestionunfamiliar, unfamiliarquantification, quantificationpeptide, peptideconc, concadalimumab
