Improved SPE for LC-MS Determination of Ractopamine and Zilpaterol in Bovine Liver: The Oasis PRiME MCX Method

Význam tématu

Rezidua veterinárních beta-agonistů ractopaminu a zilpaterolu v potravinových produktech představují zásadní problém pro veřejné zdraví a legislativní shodu. Býčí játra obsahují až čtyřnásobek běžného množství fosfolipidů oproti svalovině, což ztěžuje chromatografickou analýzu a zvyšuje riziko kontaminace kolony i hmotnostního spektrometru.

Cíle a přehled studie

Cílem práce bylo vyvinout rychlý a efektivní čistící postup pro odstranění fosfolipidů z metanolových extraktů bovinní jater před UPLC-MS/MS detekcí ractopaminu a zilpaterolu s vysokým výtěžkem a sníženými interferencemi.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika:

• Extrahování homogenizovaného vzorku jater (5 g) s trojnásobnou dávkou metanolu, sloučené extrakty upraveny na 50 mL.
• SPE čištění na Oasis PRiME MCX Vac Cartridge bez předehřevu: nabití vzorku, dvě fáze máchání (ammonium formát/formová kyselina a methanol) a eluování 5 % amoniaku v methanolu.
• Složení eluátu koncentrováno a rekonstituováno v 20:80 methanol/voda.

Instrumentace:

• LC: ACQUITY UPLC H-Class s BEH 1,7 µm (2,1×100 mm) kolonu, mobilní fáze A – 0,02 % kyselina mravenčí ve vodě, B – acetonitril:metanol (50:50), 4 µL injekce, teplota kolony 40 °C.
• MS: Xevo TQ-S micro, pozitivní ESI-MRM režim, zdrojová teplota 120 °C, desolvatace 300 °C, monitorované přechody m/z 262→185 a 262→201 pro zilpaterol, 302→164 a 302→284 pro ractopamin.

Hlavní výsledky a diskuse

• Metoda dosáhla procentuálních výtěžků 91–105 % (RSD 4,5–8,1 %) při spikingu 5–100 ng/g ractopaminu a 1–20 ng/g zilpaterolu.
• Optimalizované SPE odstranilo více než 90 % fosfolipidových interferentů ve srovnání s původním AOAC protokolem, což vedlo k čistším chromatogramům a stabilnějším signálům.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje rychlou, robustní a vysoce čistou přípravu vzorků jater pro rutinní kontrolu reziduí beta-agonistů v potravinářském průmyslu, snižuje nároky na údržbu LC a MS přístrojů a zvyšuje spolehlivost stanovení.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření SPE technologií PRiME MCX na další komplexní biologické matrice a integrace plně automatizovaných přístrojových řetězců pro vysokopropustné analytické aplikace. Vývoj nových polymerních sorbentů by mohl dále zlepšit selektivitu vazby a rozšířit spektrum analyzovaných sloučenin.

Závěr

Studie prokázala, že Oasis PRiME MCX cartridge výrazně zlepšuje čistotu metanolových extraktů bovinního jaterního materiálu a udržuje vysokou analytickou účinnost UPLC-MS/MS stanovení ractopaminu a zilpaterolu. Tento přístup je vhodný pro rychlé a spolehlivé monitorování reziduí v průmyslové i regulační praxi.

Reference

• AOAC Official Method 2011.23 Determination and confirmation of parent and total ractopamine in bovine, swine, and turkey tissues.