Oasis PRiME HLB Cartridge for Cleanup of Infant Formula Extracts Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis

Význam tématu

Stanovení reziduí veterinárních léčiv v potravinách pro kojence je klíčové pro ochranu veřejného zdraví. Praškové kojenecké mléko obsahuje bílkoviny, tuky a fosfolipidy, které mohou negativně ovlivnit chromatografickou separaci, životnost kolony a citlivost UPLC-MS/MS analýzy.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout jednoduchou a rychlou přípravu vzorku kojenecké výživy pro multireziduální stanovení širokého spektra veterinárních léčiv (tetracykliny, fluoroquinolony, sulfonamidy, makrolidy, beta-laktamy, NSAID, steroidy, beta-adrenergní látky) pomocí UPLC-MS/MS s vysokou propustností laboratoře a minimalizací nákladů.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek 0,5 g kojenecké výživy se extrahoval 3 ml 0,2% kyseliny mravenčí v 70:30 acetonitril/voda, vortex 30 s, třepání 30 min, centrifugace. Supernatant (0,5 ml) se očistil průchodem Oasis PRiME HLB cartridge (3 cc, 60 mg) bez předchozí kondice. Čistý eluát se naředil 3× 10 mM formátovým pufrem pH 4,5 a podrobil UPLC-MS/MS analýze.
Instrumentace:

• LC: ACQUITY UPLC I-Class, kolona CSH C18 1,7 µm (100×2,1 mm), injekce 5 µl, gradientní eluce (85–5–95–85% fáze A/B).
• MS: Xevo TQ-S, ESI+ (zdroj 150 °C, desolvace 500 °C, desolv. plyn 1000 L/h, kužel 30 L/h, kolizní plyn 0,15 mL/min).
• Software: MassLynx v4.1.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje celkových průměrných recoverií většiny sloučenin nad 70 %, nižší u vysoce polárních tetracyklinů. Cleanup pomocí Oasis PRiME HLB odstraní >95 % fosfolipidů a tuků s minimální ztrátou analytů (<20 %). Matricové efekty se pohybují kolem 40 %. Reprodukovatelnost (RSD) je pod 17 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Jednokrokový pass-thru cleanup bez kondice kolony a cartridgí
• Žádná dodatečná filtrace extraktu před UPLC-MS/MS
• Široký rozsah analyzovaných tříd veterinárních léčiv
• Vysoká citlivost, rychlost a reprodukovatelnost výsledků

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit na další druhy potravinářských vzorků a metabolity léčiv, integrovat s automatizovanou přípravou vzorků a používat v rutinním QA/QC pro potravinářský průmysl.

Závěr

Navržená protokolární příprava vzorku kojenecké výživy s Oasis PRiME HLB cartridge poskytuje rychlou, jednoduchou a efektivní očistu extraktu pro UPLC-MS/MS multireziduální analýzu s vysokými recoverií a minimem kontaminace aparatury.

Reference

1. M. Young, K. Tran, Oasis PRiME HLB Cartridge for Effective Cleanup of Meat Extracts Prior to Multi-Residue Veterinary Drug UPLC-MS Analysis, Waters Technology Brief 720005411EN, 2015.
2. M. Young, K. Tran, Rapid, Simple, and Effective Cleanup of Seafood Extracts Prior to UPLC-MS/MS Multiresidue Veterinary Drugs Analysis, Waters Application Note 720005488EN, 2015.