Vitamin status B1, B2 and B6

Význam tématu

Měření vitaminů B1, B2 a B6 v plné krvi umožňuje včasnou diagnostiku jejich deficitů, které se projevují neuropatiemi, poruchami koncentrace či komplikacemi u cukrovky typu 1 a 2. Přesná kvantifikace těchto vitaminů je klíčová pro cílenou léčbu, zajištění správné výživy a sledování terapeutických zásahů.

Cíle a přehled studie / článku

Text představuje kompletní LC-MS/MS sadu ClinMass® pro simultánní stanovení B1 (TPP), B2 (FAD) a B6 (PLP a PL) v plné krvi. Hlavním cílem je ukázat jednoduchou, rychlou a validovanou proceduru vhodnou pro rutinní klinické laboratoře.

Použitá metodika

Využití jednorázového analytického protokolu založeného na:

• Odebrání 50 µl vzorku plné krve a přidání 100 µl precipitantu P obsahujícího stabilně značené interní standardy.
• Jednokroková příprava (smíchání, odstředění) bez dalších derivatizačních kroků.
• Injekce supernatantu do LC-MS/MS systému a oddělení analyzovaných form vitamínů na C18 analytickém sloupci.
• Detekce jednotlivých vitamínů pomocí tandemové hmotnostní spektrometrie s kvantifikací proti lyofilizovaným kalibrátorům.

Použitá instrumentace

• LC-MS/MS systém s autosamplerem (s předmytím vzorku).
• C18 kolona dodávaná v sadě (objednací číslo MS13030).
• ClinMass® Complete Kit obsahující mobilní fáze, interní standardy, kalibrátory (4 úrovně), kontrolní vzorky (2 úrovně) a přípravné kanystry.
• Laboratorní odstředivka a základní spotřební materiál (sample pretreatment vials, precipitants).

Hlavní výsledky a diskuse

Validace metody ukázala:

• Retenční časy: TPP ~1,42 min, PLP ~1,47 min, PL ~1,55 min a FAD ~2,46 min.
• Vysokou citlivost (detekční limity řádově jednotky ng/ml) a vynikající linearitu kalibrační křivky.
• Opakovatelnost (RSD <5 %) a mezi-denní reprodukovatelnost vhodnou pro rutinní provoz.
• Dobrou selektivitu díky využití stabilně značených interních standardů.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje rychlou a standardizovanou analýzu s následujícími výhodami:

• Rychlá příprava vzorku – šetří čas laboratorního personálu.
• Komplexní balíček se všemi reagenciemi, kalibrátory i kontrolami.
• Certifikace CE-IVD – vhodné pro diagnostická pracoviště.
• Možnost rozšíření o další vitaminy či doplňky díky modulární koncepci sady.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování aplikace metody zahrnuje:

• Rozšíření panelu o další vitaminy skupiny B a metabolity.
• Automatizaci přípravy vzorku a integraci s LIMS.
• Miniaturizaci a high-throughput platformy pro velké studie výživy populace.
• Nasazení v režimu point-of-care pro rychlá rozhodnutí v klinické praxi.

Závěr

ClinMass® Complete Kit pro vitaminy B1, B2 a B6 představuje robustní a efektivní LC-MS/MS řešení pro klinické laboratoře. Díky jednoduché přípravě, certifikaci CE-IVD a kompletní dodávce reagencií je metoda okamžitě použitelná pro rutinní diagnostiku i výzkum.