VITATOX: Simultaneous Determination of Vitamins B1/B2/B6 in Whole Blood by LC MS/MS

Význam tématu

Analýza vitamínů B1, B2 a B6 v celé krvi je klíčová pro hodnocení nutričního stavu a prevenci závažných neurologických a kardiovaskulárních komplikací spojených s jejich deficiencí. Přesné simultánní stanovení zlepšuje klinické rozhodování a sledování terapie.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem prezentace je představit validovanou metodiku LC MS/MS umožňující současné měření vitamínu B1 jako thiaminpyrofosfátu (TPP), B2 ve formě FAD a B6 jako pyridoxalfosfátu (PLP) v celá krev, včetně klinického kontextu, parametrů metody, verifikace a výkonnostních charakteristik.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorku: využití lyofilizovaných kalibrátorů a kontrolních vzorků ClinCal® a ClinChek® pro zajištění přesné kalibrace.
• Chromatografie: jednorozpouštěcí (binary) pumpa, objem vstřiku 5–50 µl, interval analýzy 2,5–4 minut.
• Hmotnostní spektrometrie: tandemová detekce s čtyřmi izotopově značenými interními standardy.
• Verifikační přístroje: Waters Xevo TQ-S, Shimadzu LCMS-8050 a Sciex API 4500+/5500.

Hlavní výsledky a diskuse

• Linearita kalibrace: TPP 5,74–300 µg/l, FAD 8,11–1200 µg/l, PLP 4,56–200 µg/l.
• Preciznost: intraassay 5,8–8,1 %, interassay 6,7–14,0 %.
• Referenční intervaly jsou stanoveny s vysokou spolehlivostí pro klinické vyhodnocení.
• Stabilita referenčních materiálů: 1 den při 15–30 °C, 7 dní při 2–8 °C, 90 dní při –18 °C.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlou a přesnou simultánní analýzu tří klíčových vitamínů z jediného vzorku krve, s vysokou selektivitou a citlivostí. Je vhodná pro klinické laboratoře i výzkumná centra zaměřená na hodnocení nutričního stavu a monitoring terapie.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace metody do rutinních diagnostických panelů B-komplexu.
• Rozšíření spektra analyzovaných vitamínů a koenzymů.
• Automatizace přípravy vzorků pro zvýšení throughput.
• Vývoj kompaktních LC MS/MS systémů pro mobilní a bod-of-care aplikace.

Závěr

Validovaná metoda LC MS/MS pro simultánní stanovení vitamínů B1, B2 a B6 v celé krvi nabízí robustní, přesné a reprodukovatelné výsledky vhodné pro klinické využití v diagnostice deficiencí.

Reference

Není uvedena specializovaná literární citace; metoda vychází z prezentovaných dat a použitých referenčních materiálů ClinCal® a ClinChek®.