Jak ručně vytvořit kalibraci v chromatografickém softwaru Clarity
- Foto: DataApex: How to manually create a calibration
- Video: DataApex: How to manually create a calibration
Správná kalibrace je základním předpokladem pro kvantitativní chromatografii. Chromatografický software Clarity umožňuje vytvářet a upravovat kalibrační křivky z naměřených standardů – dokonce i zpětně. Tato příručka poskytuje podrobný, krok za krokem vedený postup, jak ručně vytvořit kalibraci z již naměřených standardů pomocí okna Calibration.
Popsaný pracovní postup je vhodný pro laboratoře provádějící analýzy GC, HPLC nebo LC/MS, kde je třeba generovat kalibrační data až po dokončení chromatografických analýz.
Potřebný software a vstupní data
Software
- Chromatografický software Clarity (kterákoli edice podporující kvantitativní kalibraci)
Předpoklady
- Chromatogramy naměřených kalibračních standardů
- Koncentrace nebo množství jednotlivých látek v každé kalibrační úrovni
- Vytvořený nebo otevřený prázdný kalibrační soubor v Clarity
Přehled pracovního postupu kalibrace
- Otevřít prázdný kalibrační soubor
- Načíst první standard
- Naimportovat integrované píky do kalibrační tabulky
- Pojmenovat látky a zadat jejich koncentrace
- Načíst další kalibrační úroveň
- Přidat pouze existující látky
- Zadávat koncentrace pro všechny kalibrační úrovně
- Propojit kalibraci s chromatogramem a ověřit výpočty
Podrobný pracovní postup
1. Otevření nebo vytvoření prázdného kalibračního souboru
V okně Calibration:
- vytvořte nový kalibrační soubor, nebo
- otevřete již připravený prázdný soubor
Tím zajistíte, že se všechny následující kroky budou zapisovat do čisté struktury kalibrace.
2. Načtěte chromatogram prvního standardu
Otevřete chromatogram odpovídající první kalibrační úrovni.
3. Přidejte všechny integrované píky
Pomocí funkce Add All:
- naimportujete všechny integrované píky do kalibrace
- všechny detekované píky se přenesou do Calibration Summary Table
Tím se vytvoří výchozí seznam látek pro kalibraci.
Poznámka:
Názvy látek jsou v celé kalibraci jednotné a nastavují se pouze jednou.
4. Přejmenujte látky (pokud je potřeba)
V Calibration Summary Table:
- přejmenujte každý pík na správný název látky
- zachovejte přesnou a jednotnou nomenklaturu – bude použita pro všechny úrovně
5. Zadejte množství látek pro 1. úroveň
Ke každé látce vyplňte:
- příslušné množství
- koncentraci
- nebo hmotnost podle prvního standardu
Tím je dokončena kalibrační úroveň 1.
6. Načtěte chromatogram druhého standardu
Otevřete chromatogram odpovídající druhé kalibrační úrovni.
Zkontrolujte nastavení v horní liště
Před přidáním píků ověřte:
- Level: 2
- Mode: Automatic
- Calibration: Enabled
Správné nastavení zajistí, že se hodnoty vloží do odpovídající kalibrační úrovně.
7. Přidejte pouze existující látky
Místo funkce Add All použijte Add Existing:
- přidají se pouze látky definované v 1. úrovni
- zachová se konzistentní identita látek napříč kalibrací
Calibration Summary Table se automaticky přepne na úroveň 2.
8. Zadejte množství látek pro 2. úroveň
Stejně jako v prvním kroku:
- doplňte množství látek pro druhý kalibrační bod
Tento postup opakujte pro všechny další kalibrační úrovně.
9. Ověřte kalibraci v okně chromatogramu
Přepněte do okna Chromatogram, kde je kalibrace propojena.
Měli byste vidět:
- správné názvy látek nad píky
- automaticky vypočtené výsledky
- kalibrační křivku aplikovanou na chromatogram
Tím ověříte, že ručně vytvořená kalibrace je aktivní a funkční.
Diskuze
Ručně vytvářená kalibrace je užitečná, když:
- standardy byly měřeny dříve než byla vytvořena kalibrace
- je potřeba rekonstruovat nebo ověřit kvantifikaci
- vyžaduje se zpětná kalibrace po revizi dat
Výhody ruční tvorby kalibrace:
- plná kontrola nad názvy látek
- možnost vyloučit nežádoucí píky
- přesné zadání všech koncentrací
- flexibilní tvorba víceúrovňových kalibrací
Závěr
Vytvoření ruční kalibrace z již naměřených standardů v Clarity je jednoduché, pokud se dodrží strukturovaný pracovní postup. Použitím funkcí Add All a Add Existing, správným přiřazením názvů látek a přesným zadáním množství pro jednotlivé úrovně lze rychle a spolehlivě vytvořit kalibrační křivky potřebné pro kvantitativní analýzu.
Tato metoda je ideální pro laboratoře, které potřebují kalibraci zrekonstruovat, upravit nebo zpřesnit mimo automatizované akviziční workflow.
Pro další návody a pokročilá školení Clarity navštivte oficiální YouTube kanál společnosti DataApex.
