Jak provést rekalibraci v chromatografickém softwaru Clarity
- Foto: DataApex: How to recalibrate a level in the calibration
- Video: DataApex: How to recalibrate a level in the calibration
Kalibrace je klíčovou součástí kvantitativní chromatografické analýzy. Přesné kalibrační křivky zajišťují spolehlivé stanovení koncentrací, dodržení laboratorních kvalitativních standardů a reprodukovatelnost mezi jednotlivými analýzami.
Tento návod poskytuje podrobný popis toho, jak opravit jednotlivou úroveň kalibrace v chromatografickém softwaru Clarity, a vychází z postupů předvedených v přiloženém instruktážním videu.
Ať už se kalibrační bod odchyluje od očekávaných hodnot, nebo je nutné standardní roztok znovu změřit, software nabízí dva systematické přístupy ke zlepšení přesnosti kalibrační křivky.
1. Porozumění problémům s úrovní kalibrace
Při rutinní kontrole kalibrace může analytik zjistit, že jedna z úrovní kalibrace neodpovídá očekávané odezvě detektoru. Může k tomu dojít z několika důvodů:
- chyby při přípravě standardního roztoku
- nestabilita přístroje během nástřiku
- kontaminace nebo carryover
- drift nebo další variabilita přístroje
V příkladu uvedeném ve videu vykazuje kalibrační úroveň 2 hodnoty mimo očekávaný trend a vyžaduje korekci.
Clarity nabízí dvě možná řešení:
- odstranit problémový kalibrační bod z křivky
- překalibrovat úroveň opakovaným měřením standardu
2. Metoda 1: Odstranění kalibračního bodu
Kdy tuto metodu použít
- pokud již není k dispozici příslušný standardní roztok
- pokud je zřejmé, že se jedná o jednorázovou chybu měření
- pokud je potřeba rychlá oprava bez generování nových dat
Postup krok za krokem
- Otevřete okno Calibration v Clarity.
- Přejděte na záložku konkrétní látky, u které problém nastal.
- Vyhledejte příslušnou kalibrační úroveň.
- Zrušte zaškrtnutí políčka Used u této úrovně.
Po odškrtnutí je kalibrační bod vyloučen z výpočtu křivky a její nový průběh se automaticky přepočítá.
3. Metoda 2: Překalibrování úrovně (doporučené)
Proč je tato metoda preferována
Rekalibrace zajistí, že datová sada bude plně odpovídat skutečné odezvě přístroje. Jde o nejvědečtější a nejpřesnější přístup, protože chybný bod je nahrazen novým, validním měřením.
Nastavení před měřením
- Otevřete Calibration Options.
- Nastavte režim Recalibration Mode = Replace.
Tím zajistíte, že nové měření nahradí chybné hodnoty.
Pro detailnější informace je možné nahlédnout do návodů či videí How to Modify Calibration Settings.
4. Postup rekalibrace: krok za krokem
Krok 1: Otevřete Single Analysis
Přejděte do režimu Single Analysis.
Krok 2: Výběr správné metody
Načtěte metodu, ke které je vázaná příslušná kalibrace.
Krok 3: Změna typu vzorku
Nastavte Sample Type = Standard.
Krok 4: Určení kalibrační úrovně
Zadejte, která úroveň má být překalibrována (např. Level 2).
Krok 5: Odeslání metody a spuštění analýzy
- odešlete metodu do přístroje
- injektujte kalibrační standard dané úrovně
- spusťte analýzu
Clarity automaticky nahradí chybný kalibrační bod novým měřením a přepočítá křivku.
5. Ověření aktualizace kalibrace
Po dokončení chromatografické analýzy
- Vraťte se do okna Calibration.
- Ověřte, že rekalibrace byla provedena.
- Zkontrolujte kalibrační křivku vizuálně.
- Klikněte na ikonu tří teček u příslušné úrovně a zobrazte detailní informace:
- odezvy detektoru
- koncentrace
- retenční časy
- parametry fitu
V uvedeném příkladu vykazuje křivka po rekalibraci výrazně lepší linearitu.
6. Diskuze: Výběr vhodného postupu
Odstranění bodu (rychlá oprava)
- velmi rychlé řešení
- může snížit přesnost kalibrace
- vhodné pouze tehdy, když není možné standard znovu změřit
Rekalibrace (best practice)
- vědecky nejkorektnější postup
- zajišťuje plně validovanou datovou sadu
- vhodná pro GLP a GMP
- preferovaná v regulovaných prostředích
Pokud je to možné, vždy by měla být upřednostněna rekalibrace před odstraněním bodu.
Závěr
Oprava jednotlivé úrovně kalibrace v softwaru Clarity je snadná, pokud analytik využije nástroje pro odstranění nebo rekalibraci bodu. Systematickým postupem podle výše uvedených kroků lze udržet přesné a spolehlivé kalibrační křivky, které podporují vysokou kvalitu analytických výsledků.
Pravidelné ověřování výkonnosti kalibrace je nezbytné pro udržení přesnosti přístroje, zejména v kvantitativních chromatografických aplikacích.
Pro další instruktážní zdroje navštivte oficiální YouTube kanál Clarity a související softwarovou dokumentaci.
