HPLC.cz: Rychlý vývoj metod s LabSolutions MD

Software LabSolutions MD, založen na AQbD, zvyšuje efektivitu jednotlivých fází vývoje analytických HPLC metod a umožňuje vývoj optimální analytické metody i méně zkušenému operátorovi.

💡💡💡 HPLCcz tým: Pomozte nám příští ročník konference připravit co nejlépe a věnujte nám 30 vteřin Vašeho času vyplněním krátkého dotazníku

Tradiční vývoj LC metody

1. Stanovení cílů
2. Výběr mobilních fází pro testování
3. Výběr kolon pro testování
4. Vytvoření základní metody
5. Změna jedné proměnné → Uložit jako…
6. Změna jedné proměnné → Uložit jako…
7. Změna jedné proměnné → Uložit jako…
8. Změna jedné proměnné → Uložit jako…
9. Změna jedné proměnné → Uložit jako…

10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 …

• Velké množství metod!
• Pracné!
• Zdlouhavé!
• Jednoduché udělat chybu!

Shimadzu: Hodnocení výsledků „okometricky“ pohledem na chromatogram

Hodnocení výsledků „okometricky“ pohledem na chromatogram.

Při metodě pokus-omyl se spoléháme na zkušenosti a know-how analytika

→ Poptávka po efektivním, automatizovaném procesu, který je méně závislý na zkušenostech operátora

Labsolutions MD a vývoj založený na AQbD

Metodické posouzení faktorů ovlivňující metodu krok po kroku

Screening

• Screening hlavních faktorů ovlivňujících separaci

Shimadzu: Screening hlavních faktorů ovlivňujících separaci

Optimalizace

• Optimalizace separačních podmínek

Shimadzu: Optimalizace separačních podmínek

Validace

• Zhodnocení robustnosti analytické metody

Shimadzu: Zhodnocení robustnosti analytické metody

Nexera Method Scouting System

• Možnost výběru až mezi 8 mobilními fázemi a 12 kolonami
• UHPLC systém (tlaková odolnost 130 MPa)

Shimadzu: Nexera Method Scouting System

LabSolutions MD - Workflow

„Workflow“ od analýzy po procesování výsledků

• Vytvoření sekvence
• Vytvoření DoE
• Import DoE
• Chromatogram
• Identifikace píků
• ANOVA
• Simulace separace
• Report

Shimadzu: „Workflow“ od analýzy po procesování výsledků

Fáze screeningu

Rychlá a jednoduchá tvorba sekvencí

• Plně automatizovaná tvorba metod a sekvencí

Shimadzu: Rychlá a jednoduchá tvorba sekvencí

Fáze screeningu - Tvorba sekvence

• LabSolutions MD automaticky vytvoří sekvence, které se přenesou do LabSolutions
• Možná kontrola nastavených podmínek v sekvenci
• Možnost úpravy sekvence uživatelem → řádky mohou být kopírovány/vloženy, odstraněny, přidány

Výpočet ušetření času

6 Mobilních fází + 6 Kolon + 2 Gradienty + 2 Teploty = 6 × 6 × 2 ×2 = 144 kombinací

Shimadzu: Výpočet ušetření času manuální testování vs. Labsolution MD

• LabsolutionsMD zkrátí čas tvorby metod a sekvence pouze na pár minut
• Automatizované tvoření metod a sekvence značně snižuje šanci lidské chyby

Vyhodnocení dat Fáze screeningu

Hodnocení chromatogramů na základě počtu detekovaných píků a jejich rozlišení (hodnota E)

Shimadzu: Hodnocení chromatogramů na základě počtu detekovaných píků a jejich rozlišení

• Hodnota E je vypočítána jako: Počet detekovaných píků (P) × Rozlišení (Rs)
• Max. hodnota rozlišení 5 -> zamezení nadhodnocení výsledků

Fáze optimalizace

• Na základě vhodných podmínek vybraných ve screeningové fázi se vytvoří design experimentu (DoE).
• LabSolutions MD dokáže z limitovaných naměřených dat vytvořit simulaci separačních podmínek i mimo naměřená data – tzv. Design Space.

Shimadzu: Vytvoření designu experimentu (DoE)

3 parametry, 3 hodnoty / Počet experimentů

• Full Factorial Design / 27
• Box-Behnken Design / 13（snížení času analýz o 52 %）
• Central Composite Design / 15（snížení času analýz o 44 %)

Vizualizace „Design Space“ Fáze optimalizace

Výsledek změny analytických podmínek je vizualizován pomocí heatmapy tzv. „Design Space“

Na základě zadaných požadavků SW automaticky vyhodnotí optimální separační parametry uvnitř „Design Space“

Simulovaný chromatogram separačních podmínek uvnitř „Design Space“

Shimadzu: Simulovaný chromatogram a Polynomický model

Zhodnocení robustnosti Fáze validace

Po stanovení optimálních separačních podmínek by měla být otestována robustnost metody řadou experimentů s lehce pozměněnými parametry metody

LabSolutions MD umí automaticky vytvořit set experimentů pro spolehlivé zhodnocení robustnosti vyvinuté metody

Shimadzu: Zhodnocení robustnosti

Závěr

• LabSolutions MD Vás provede:

  • Screeningovou fází
  • Optimalizací metody
  • Ověřením robustnosti

• AQbD zajišťuje vývoj spolehlivých a robustních metod

• Snižuje nároky na zkušenosti operátora

• Značné urychlení vývoje metody

Výběr literatury k software Shimadzu LabSolutions MD dostupné v knihovně LabRulezLCMS

• Efficient Method Development of Oligonucleotides by Reversed-Phase Ion-Pair Chromatography (Aplikace | 2023)

• Efficient Method Development by automated pH Screening with LabSolutions MD (Technické články | 2023)

• Efficient Method Development through Design Space Evaluation on Different Brand of Columns (Aplikace | 2022)

• Optimization of Ion Analytical Conditions in Pharmaceuticals Using LabSolutions MD (Aplikace | 2022)

• Effcient method development based on Analytical Quality by Design with LabSolutions MD software (Technické články | 2022)

• HPLC.cz: Rychlý vývoj metod s LabSolutions MD (Prezentace | 2023)

• VITATOX: Rychlý vývoj metod s LabSolutions MD (Prezentace | 2023)

• Solution for Method Development and Analytical Quality by Design - LabSolutions MD (Brožury a specifikace | 2021)

• Efficient Method Development by automated pH Screening with LabSolutions MD (Aplikace | 2023)

• Efficient Method Development on Pharmaceutical Impurities Using Single Quadrupole Mass Spectrometer (Aplikace | 2022)

• Efficient Method Development on Pharmaceutical Impurities based on Analytical Quality by Design (Aplikace | 2022)