Průvodce řešením problémů v HPLC - Vysoký a nízky tlak, fluktuace
- Foto: Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Vysoký a nízky tlak, fluktuace
- Video: Shimadzu Analytical and Measuring Instruments: Enhancing Lab Performance with Nexera Auto-Recovery & Auto-Diagnostic Features
V prvním díle seriálu o řešení problémů v HPLC jsme se podívali na základní tipy jak Váš HPLC systém provozovat a také osvědčené postupy pro odstraňování problémů, pokud se nakonec vyskytnou.
Druhý díl - chromatografické píky přinesl detailnější pohled na problematiku chromatografických píků z pohledu chvostování nebo frontování, širokých píků, žádných píků, píků navíc nebo píků dvojitých.
Třetí díl seriálu rozebral postupy v případě výskytu fluktuace retenčních časů, ztráty rozlišení, změny citlivosti, driftu základní linie nebo šumu základní linie.
Poslední, čtvrtý díl, se zaměří tlak a varianty nejběžnějších problémů s ním v HPLC spojených. Zodpovíme otázky typu: tlak není zobrazen, ale průtok je správný, Nízký tlak, Fluktuace tlaku, Vysoký tlak.
Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC
Kompletní příručka dostupná ke stažení v knihovně!
Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Tlak není zobrazen, ale průtok je správný
Tlak není zobrazen, ale průtok je správný
Porucha snímače
- Opravte nebo vyměňte snímač tlaku.
Nekompatibilita softwaru
- Použijte alternativní software, který umožňuje záznam tlaku.
Proplachovací ventil ponechán otevřený
- Zavřete ventil.
Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Nízký tlak
Nízký tlak
Částečná netěsnost v systému
- Zkontrolujte všechna připojení a utáhněte všechna netěsná místa.
Průtok
- Zkontrolujte, zda je v metodě nastaven správný průtok.
- Vyzkoušejte přesnost průtoku pomocí kalibrovaného průtokoměru, nebo změřte čas naplnění definovaného objemu.
Metoda
- Ověřte, zda metoda používá správnou teplotu a správná rozpouštědla.
Špatná kolona
- Použijte kolonu se správnými rozměry a geometrií částic.
Příliš vysoká teplota kolony
- Nastavte odpovídající teplotu kolony a zkontrolujte, zda nedošlo k jejímu poškození, pokud dojde k překročení limitu teploty kolony.
Porucha snímače
- Opravte nebo vyměňte snímač tlaku.
Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Fluktuace tlaku
Fluktuace tlaku
Vzduchové bubliny
- Propláchněte cestu MF pro odstranění vzduchových bublin.
Opotřebení těsnění pumpy
- Vyměňte těsnění.
Zkontrolujte ventily
- Ultrazvukujte zpětné ventily v isopropanolu.
- Pokud problém přetrvává, vyměňte zpětné ventily.
Netěsnosti
- Poškození těsnění čerpadla může způsobit malé netěsnosti. Vyměňte těsnění. Zkontrolujte spojky.
Nedostatečné odplynění
- Odplyňte rozpouštědlo, vyměňte frity mobilní fáze; je-li nutno opravte degasser.
Použití gradientové eluce
- Cyklus tlaků způsobený změnami viskozity je normální, ale použijte přiměřeně velký objem mixéru.
Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Vysoký tlak
Vysoký tlak
Nastaven vysoký průtok
- Snižte nastavení průtoku
Ucpaná kolona
- Propláchněte kolonu zpětným tokem (pokud lze), nebo ji vyměňte.
Nekompatibilní MF (sraženina pufru nebo nemísitelné složky)
- Použijte správnou MF; propláchněte kolonu a znovu ekvilibrujte
Nesprávná kolona
- Použijte kolonu správného rozměru a geometrie částic
Zablokovaný injektor
- Odstaňte překážku (zkontrolujte jehlu, smyčku, ventil s HPV výstup).
Zablokovaná ochranná kolona/kartridž
- Vyměňte nebo odstraňte guard kolonu
Zablokovaný in-line filtr
- Vyměňte nebo odstraňte filtr.
Příliš nízká teplota kolony
- Nastavte správnou teplotu.
Vadný senzor
- Opravte nebo vyměňte snímač tlaku.
In-line filtr pumpy je zablokován
- Vyměňte filtr
