Veterinary Drug Detection in Pork and Milk - Using an Ultivo LC/TQ with a standard ESI ion source

Význam tématu

Veterinární léčiva se běžně používají ke kontrole chorob a podpoře růstu u hospodářských zvířat. Zbytky těchto látek v potravinářských produktech mohou představovat riziko pro lidské zdraví a vyžadují spolehlivou detekci a kvantifikaci k zajištění souladu s mezinárodními předpisy.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout rychlou desetiminutovou LC/TQ metodu pro kvantifikaci 12 regulovaných veterinárních léčiv v mléce a vepřovém mase. Metoda využívá Agilent 1260 Infinity II Prime LC a Agilent Ultivo LC/TQ s ESI zdrojem a je validována pro úroveň až 5× MRL podle globálních nařízení.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky (2 g mléka nebo masa) byly homogenizovány s EDTA, extrahovány acetonitrilem s 2 % kyselinou mravenčí a 2 % DMSO, centrifugovány a čištěny pomocí Captiva EMR–Lipid kazet. Chromatografická separace probíhá na kolóně Poroshell 120 EC-C8 (2,1×100 mm, 2,7 µm) při 40 °C s gradientem (0,2 % formic acid ve vodě vs. 0,5 mM NH4F v methanolu) při průtoku 0,35 mL/min. Detekce je prováděna v režimu dynamic MRM na Ultivo LC/TQ (teplota plynu 325 °C, průtok 8 L/min, napětí 2000 V). Data byly zpracovány softwarem MassHunter Quantitative Analysis B.09 s funkcí Quant-My-Way.

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity II Prime LC (pumpa G7104C, autosampler G7167A, thermostat G7116A)
• Agilent Ultivo Triple Quadrupole LC/MS s ESI zdrojem (G1948B)
• Agilent Captiva EMR–Lipid kazety, 6 mL, 600 mg (p/n 5190-1004)
• Heidolph Hei-MIX Multi Reax vortexer

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla kvantifikace všech 12 léčiv na úrovni 1/2 MRL, u většiny sloučenin i na 1/10 MRL. Relativní standardní odchylky (RSD) byly pod 14 %. Kalibrační křivky vykazovaly R2 > 0,98. Recovery (60–120 %) bylo uspokojivé pro většinu analyzů, u velmi hydrofilních streptomycinů bylo doporučeno použití interních standardů k nápravě ztrát při extrakci.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená metodika umožňuje vysokou propustnost a spolehlivou citlivost splňující požadavky mezinárodních regulací. Čištění pomocí EMR–Lipid kazet efektivně odstraňuje lipidy z tukových matric a zlepšuje robustnost analýzy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit zavedením interních standardů, rozšířením spektra sledovaných sloučenin a přechodem na hmotnostní analyzátory s vysokým rozlišením. Automatizace přípravy vzorků a integrace do laboratoří QA/QC zvýší efektivitu rutinního testování.

Závěr

Agilent Ultivo LC/TQ s ESI zdrojem ve spojení s 1260 Infinity II Prime LC je efektivní řešení pro rychlou a citlivou detekci veterinárních léčiv v mléce a mase, splňující či překračující globální regulační požadavky.

Reference

• US FDA, 21 CFR Parts 514 a 558 (FDA-2010-N-0155).
• Evropské nařízení 2014/0257 (SMPR AOAC).
• Ministry of Agriculture of China, Announcement No. 235, 2002.
• Health Canada, List of MRLs for Veterinary Drugs, 2017.
• Zhao L.; Lucas D., Agilent Application Note 5991-8598EN, 2017.