Using Self-Aware Agilent InfinityLab LC/MSD iQ to Measure Trace-Level Impurities in a Brand Versus Generic Medication

Význam tématu

Odhalení stopových nečistot v bezreceptových lécích, jako je acetaminofen, je klíčové pro zajištění bezpečnosti a kvality farmaceutických produktů. Regulace FDA stanovuje limity pro příbuzné nečistoty, které tradiční HPLC/UV často nedokáže spolehlivě detekovat při nízkých hladinách. Zavedení citlivějších a selektivních LC/MS metod umožňuje přesnou identifikaci i kvantifikaci stopových sloučenin.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo porovnat profil příbuzných nečistot v originálním a generickém OTC přípravku s acetaminofenem. Použití Agilent InfinityLab LC/MSD iQ spolu s 1290 Infinity II LC umožnilo detekci nečistot na úrovni ng/mL, pod hranicí UV detekce. Studie zahrnovala přípravu externích kalibračních křivek, optimalizaci chromatografických podmínek a aplikaci režimu selektivního monitorování (SIM).

Použitá metodika

Vzorky nečistot byly připraveny ředěním standardů do pracovních roztoků (0,1–10 µg/mL) v MeOH/H2O (80:20) a následně třikrát analyzovány pro tvorbu kalibračních křivek s R2 > 0,99. Tablety obsahující 500 mg API extrahovány v MeOH, po centrifugaci vzorku aplikováno 1 µL injekce. Chromatografie probíhala na koloně EC-C8 3,0 ×150 mm (2,7 µm) s gradientem 10–80 % MeOH s 0,1 % kyseliny octové, průtok 0,6 mL/min, DAD 265 nm a SIM režim m/z 110, 152, 194, 166, 136, 140, 170.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II High Speed Pump (G7120A)
• Agilent 1290 Infinity II Vialsampler (G7129B)
• Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat (G7116B)
• Agilent 1290 Infinity II Diode Array Detector (G7117B) s Max-Light cartridge cell (60 mm)
• Agilent LC/MSD iQ (G6160AA) s ESI+
• Agilent OpenLab CDS 2.4 pro akvizici a zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Externí kalibrace ukázala vynikající linearitu (R2 > 0,99) pro API i nečistoty. Díky vestavěnému přepojovacímu ventilu byl API ve vysoké koncentraci cíleně směrován do odpadu, čímž byla chráněna MS detekční jednotka. Ve vzorcích originálního produktu byly detekovány čtyři nečistoty (4-aminofenol, RC-A, RC-B, RC-D), v generickém tři (4-aminofenol, RC-A, RC-B). Generický vzorek obsahoval vyšší množství příbuzných látek, i když úrovně zůstaly pod limity 0,03 % API.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Vysokou selektivitu díky hmotnostní selekci
• Schopnost detekovat nečistoty v ng/mL úrovních
• Ochranu MS systému pomocí divert ventilu
• Rychlou integraci do existující LC s minimální úpravou
• Kompatibilitu s GxP laboratořemi a dodržování FDA 21 CFR Part 11

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj zahrnuje automatizovanou samodiagnostiku přístrojů, integraci vyššího rozlišení MS pro lepší charakterizaci neznámých látek, rozšíření aplikace na další API a uplatnění v real-time monitoringu výrobních procesů. Digitalizace pracovních postupů a propojení s LIMS posílí datovou integritu a efektivitu analýzy.

Závěr

Agilent InfinityLab LC/MSD iQ spolu s 1290 Infinity II LC prokázal spolehlivost a citlivost pro stanovení stopových nečistot v OTC lécích. Metoda umožňuje detailní srovnání impuritního profilu originálních a generických produktů, splňuje regulatorní požadavky a zvyšuje efektivitu workflow v QA/QC laboratořích.

Reference

1. Generic Drugs. US FDA, May 16, 2019. Retrieved July 22, 2019.
2. Acetaminophen USP Monograph. The United States Pharmacopeia Convention, May 1, 2014.
3. Guidance for Industry Q3B(R2) Impurities in New Drug Products. ICH, July 2006, Rev. 2.