Isolate and Reanalyze Pharma Impurities with the Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD System
Aplikace | 2020 | Agilent TechnologiesInstrumentace
Izolace a charakterizace organických nečistot ve farmaceutických vzorcích je klíčová pro zajištění kvality léčivých přípravků. Degradace a meziprodukty syntézy mohou ovlivnit účinnost a bezpečnost finálního produktu. Zefektivnění workflow izolace, sběru a opětovné analýzy nečistot přispívá k rychlejšímu vývoji a validaci látek.
Cílem bylo předvést kompletní postup čištění a analýzy malých molekul pomocí jediného přístrojového řešení Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD. Klíčové kroky zahrnují vývoj analytické metody, převedení na preparativní podmínky, sběr frakcí a jejich následnou reanalýzu bez manuálních zásahů.
Metodika začala optimalizací gradientu na analytické kolonce C18 s objemem injekce 10 až 50 μl. Převedení na preparativní režim proběhlo pomocí kalkulátoru pro udržení zachování retenčních časů při průtoku až 32 ml/min a objemu vzorku do 3 ml. Sběr frakcí byl řízen UV signálem (254 nm) s nastavením prahu a rychlosti změny signálu. K opětovné analýze byly frakce homogenizovány autosamplerem a injikovány na analytický LC/MSD.
Instrumentální vybavení:
Při analýze zhoršeného vzorku ibuprofenu se na analytické chromatogramu objevilo několik neznámých píků. Převedení do preparativního režimu zachovalo rozlišení a umožnilo izolovat deset frakcí. Reanalýza odhalená nízkou čistotu frakcí 2, 3 a 8 (45–70 %), které nebyly zřejmé při analytickém sledování. Hmotnostní spektra napovídají přítomnost ibuprofenaldehydu a dalších degradačních produktů. Výsledky potvrzují nezbytnost kontroly čistoty každé frakce.
Integrovaný systém eliminuje přenos vzorků mezi přístroji a minimalizuje manuální kroky, čímž zkracuje dobu analýzy a snižuje riziko chyb. Automatizovaná homogenizace a opětovná injekce frakcí zvyšuje spolehlivost kvantifikace i kvalitativního hodnocení nečistot.
Další rozvoj se očekává v oblasti pokročilé automatizace a umělé inteligence pro návrh a optimalizaci metod. Integrace vysoce rozlišené hmotnostní spektrometrie, mikroprůtokových technologií a zelených rozpouštědel zvýší efektivitu a udržitelnost purifikačních procesů.
Příklad použití Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD prokázal, že přechod z analytické na preparativní fázi, sběr a reanalýza frakcí lze provést na jediném systému s minimálním uživatelským zásahem. Tento přístup zlepšuje kvalitu izolace nečistot a zkracuje čas potřebný k potvrzení čistoty.
HPLC
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceAgilent Technologies
Souhrn
Význam tématu
Izolace a charakterizace organických nečistot ve farmaceutických vzorcích je klíčová pro zajištění kvality léčivých přípravků. Degradace a meziprodukty syntézy mohou ovlivnit účinnost a bezpečnost finálního produktu. Zefektivnění workflow izolace, sběru a opětovné analýzy nečistot přispívá k rychlejšímu vývoji a validaci látek.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem bylo předvést kompletní postup čištění a analýzy malých molekul pomocí jediného přístrojového řešení Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD. Klíčové kroky zahrnují vývoj analytické metody, převedení na preparativní podmínky, sběr frakcí a jejich následnou reanalýzu bez manuálních zásahů.
Použitá metodika a instrumentace
Metodika začala optimalizací gradientu na analytické kolonce C18 s objemem injekce 10 až 50 μl. Převedení na preparativní režim proběhlo pomocí kalkulátoru pro udržení zachování retenčních časů při průtoku až 32 ml/min a objemu vzorku do 3 ml. Sběr frakcí byl řízen UV signálem (254 nm) s nastavením prahu a rychlosti změny signálu. K opětovné analýze byly frakce homogenizovány autosamplerem a injikovány na analytický LC/MSD.
Instrumentální vybavení:
- Agilent 1290 Infinity II Preparative Binary Pump
- Agilent 1260 Quaternary Pump
- Agilent 1290 Preparative Open-Bed Sampler/Collector
- Agilent 1260 Diode Array Detector a Variable Wavelength Detector
- Agilent 1290 Preparative Column Compartment a Valve Drive
- Agilent InfinityLab LC/MSD XT s ESI zdrojem
- Softwarové řízení a zpracování dat v Agilent OpenLab CDS ChemStation
Hlavní výsledky a diskuse
Při analýze zhoršeného vzorku ibuprofenu se na analytické chromatogramu objevilo několik neznámých píků. Převedení do preparativního režimu zachovalo rozlišení a umožnilo izolovat deset frakcí. Reanalýza odhalená nízkou čistotu frakcí 2, 3 a 8 (45–70 %), které nebyly zřejmé při analytickém sledování. Hmotnostní spektra napovídají přítomnost ibuprofenaldehydu a dalších degradačních produktů. Výsledky potvrzují nezbytnost kontroly čistoty každé frakce.
Přínosy a praktické využití metody
Integrovaný systém eliminuje přenos vzorků mezi přístroji a minimalizuje manuální kroky, čímž zkracuje dobu analýzy a snižuje riziko chyb. Automatizovaná homogenizace a opětovná injekce frakcí zvyšuje spolehlivost kvantifikace i kvalitativního hodnocení nečistot.
Budoucí trendy a možnosti využití
Další rozvoj se očekává v oblasti pokročilé automatizace a umělé inteligence pro návrh a optimalizaci metod. Integrace vysoce rozlišené hmotnostní spektrometrie, mikroprůtokových technologií a zelených rozpouštědel zvýší efektivitu a udržitelnost purifikačních procesů.
Závěr
Příklad použití Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD prokázal, že přechod z analytické na preparativní fázi, sběr a reanalýza frakcí lze provést na jediném systému s minimálním uživatelským zásahem. Tento přístup zlepšuje kvalitu izolace nečistot a zkracuje čas potřebný k potvrzení čistoty.
Reference
- Guillarme D., Rudaz S., Veuthey J.-L. Eur. J. Pharm. Biopharm. 2008, 68, 430–440.
- Spuling I., Rieck F. Spotting Fraction Impurities with More Confidence Using the Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Sampler/Collector. Agilent Technologies Technical Overview 2019, 5994-1643EN.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Efficient Purification of Synthetic Peptides at High and Low pH
2022|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Biopharma/Pharma Efficient Purification of Synthetic Peptides at High and Low pH mAU 2,000 1,500 1,000 500 0 mAU 1,500 Generic Focused 1 2 3 4 5 6 7 8 min 1 2 3 4 5 6 7 min…
Klíčová slova
preparative, preparativemau, maumin, minmsd, msdtarget, targettime, timescale, scalefraction, fractionangiotensin, angiotensinpeptide, peptidefocused, focusedcollection, collectionwere, wereruns, runscps
Reduce Your Purification Footprint: Scouting, Collection, and Reanalysis in Well Plates on a Single System
2020|Agilent Technologies|Technické články
Technical Overview Reduce Your Purification Footprint: Scouting, Collection, and Reanalysis in Well Plates on a Single System Author Florian Rieck Agilent Technologies, Inc. Abstract Typical purification workflows using high-performance liquid chromatography (HPLC) involve two systems: the analytical system is used…
Klíčová slova
preparative, preparativefractions, fractionspurification, purificationdilution, dilutionfraction, fractionsample, samplescouting, scoutingtarget, targetcollection, collectionmsd, msdanalytical, analyticalreinjection, reinjectionsoftware, softwaresamples, samplessandwich
Purification of Cannabinoids from a Cannabis sativa Extract
2020|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Food Testing & Agriculture Purification of Cannabinoids from a Cannabis sativa Extract Author Florian Rieck Agilent Technologies, Inc. Abstract With the growth of cannabinoid-containing products offered by the food, cosmetics, and healthcare industry, isolation of single cannabinoids to…
Klíčová slova
fraction, fractionmsd, msdcannabinoids, cannabinoidscollection, collectioncbd, cbdpreparative, preparativecps, cpspurification, purificationmin, minscouting, scoutingcannabis, cannabisanalytical, analyticalsim, simtetrahydrocannabivarin, tetrahydrocannabivarinvisible
Spotting Fraction Impurities with More Confidence Using the Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Sampler/Collector
2019|Agilent Technologies|Technické články
Technical Overview Spotting Fraction Impurities with More Confidence Using the Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Sampler/Collector Authors Irina Spuling and Florian Rieck Agilent Technologies, Inc. Abstract The Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Sampler/Collector combines sample injection and fraction…
Klíčová slova
homogenization, homogenizationfraction, fractioncollector, collectorreanalysis, reanalysisfractions, fractionsbed, bedsampler, sampleropen, openpreparative, preparativeopenlab, openlabcollected, collectedchemstation, chemstationconveniently, convenientlycds, cdsfeature
