Reduce Your Purification Footprint: Scouting, Collection, and Reanalysis in Well Plates on a Single System

Význam tématu

Purifikace malých molekul za pomocí kombinovaného analyticko-preparativního systému představuje efektivní přístup ke zkrácení času a snížení rizika chyb v čistících postupech. Významná je především v oblasti chemického výzkumu a vývoje, kde se požaduje vysoká spolehlivost výsledků a optimalizace laboratorního prostoru.

Cíle a přehled studie / článku

Článek popisuje integraci analytického a preparativního LC systému na platformě Agilent InfinityLab LC Purification Solutions řízenou jedním softwarovým balíčkem. Cílem je zjednodušit scouting, vývoj metody, sběr a opětovnou analýzu frakcí v destičkovém formátu bez nutnosti přesunu vzorků mezi přístroji.

Použitá metodika

Bylo využito šest vzorků různé polarity připravených ve směrných rozpouštědlech. Workflow zahrnovalo:

• rozdělení vzorku na koncentrovaný roztok a ředěnou část pro analytický scouting
• automatické výpočty gradientů a jejich zaměření na cílové složky
• škálování analytických podmínek na preparativní (faktor 10000)
• automatizované ředění, vkládání plugů a hromadné odběry frakcí

Použitá instrumentace

Agilent 1290 Infinity II Autoscale Preparative LC/MSD system (Binary Pump G7161B, Quaternary Pump G7111B, Open-Bed Sampler/Collector G7158B, VWD G7114A, DAD G7115A, MS G6135B) a doplňkové moduly Valve Drive, Delay Coil Organizer, Column Compartment; analytické a preparativní C18 kolony; software OpenLab CDS ChemStation C.01.10 a Automated Purification A.01.08; rozpouštědla LC-grade acetonitril, methanol, DMF, DMSO a ultrapure voda.

Hlavní výsledky a diskuse

Software automaticky identifikoval cílové píky překrytím UV a EIC signálů a vytvořil fokální gradienty, čímž zkrátil dobu běhu a spotřebu rozpouštědel. Při škálování na preparativní režim zůstalo oddělení cílové složky efektivní. U vzorku 6 bylo prokázáno, že frakce 3 dosahuje 98% čistoty, zatímco frakce 4 obsahovala stopy další složky. Opětovná analýza frakcí proběhla automaticky bez fyzického přesunu.

Přínosy a praktické využití metody

• automatizace snižuje riziko lidské chyby
• celá procedura probíhá na jediné destičce s 48 jamkami
• úspora laboratorního prostoru a spotřeby rozpouštědel
• snadná sledovatelnost a integrita vzorků

Budoucí trendy a možnosti využití

• další integrace s robotickými stanicemi a umělou inteligencí
• prediktivní optimalizace gradientů
• rozšíření metodiky na biofarmaceutické aplikace
• online monitoring a proaktivní údržba systémů

Závěr

Kombinovaný analyticko-preparativní LC systém ovládaný pokročilým softwarem výrazně zjednodušuje a urychluje proces purifikace malých molekul, snižuje spotřebu zdrojů i riziko chyb.

Reference

1. Spuling I.; Rieck F. Spotting Fraction Impurities with More Confidence Using the Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Sampler/Collector. Agilent Technologies technical overview, 5994-1643, 2019.