An End-to-End Workflow Solution For Quick and Easy Quantitative Analysis of Multiclass Veterinary Drug Residues in Meat Using LC-MS/MS

Význam tématu

Veterinární léčiva se rutinně používají ke zlepšení zdraví a přírůstku hospodářských zvířat. Nevhodné dávkování nebo překročení stanovených limitů reziduí může ohrozit bezpečnost potravin a zdraví spotřebitelů. Regulace stanovené v rámci EU, USA či podle směrnic AOAC vyžadují citlivé, spolehlivé a rychlé metody pro detekci a kvantifikaci zbytků veterinárních léčiv v potravinách živočišného původu.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentovaného workflow je nabídnout kompletní end-to-end analytickou cestu pro rychlou a přesnou kvantifikaci více než 200 různých tříd veterinárních léčiv v masných vzorcích. Studie demonstruje robustnost, citlivost i opakovatelnost metody a dokládá její uplatnitelnost pro rutinní screening v různých typech svalovin (kuřecí, hovězí, vepřové).

Použitá metodika a instrumentace

Popis analytického postupu:

• Příprava vzorku: 2 g homogenizovaného masa (vzorek, blank, spike).
• Extrahování: dvojí extrakce kyselinou + EDTA v kyselém acetonitrilu.
• Odstředění a čištění: kombinace Agilent Captiva EMR-Lipid a PPM-48 cartridge.
• Analýza: LC-MS/MS ve dMRM režimu.

Instrumentace:

• Hmotnostní spektrometrie: Agilent 6470 LC/TQ nebo 6495C LC/TQ.
• Kapalinová chromatografie: Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 kolona.
• Software: Agilent MassHunter Workstation.

Hlavní výsledky a diskuse

• Citlivost: LOD v rozmezí 0,1–10 µg/kg, linearita s R2>0,99 pro všechny analyty.
• Obnova: průměrné návratnosti 70–120 % při zásazích 1, 10 a 25 µg/kg.
• Opakovatelnost intrabatch: <15 % RSD pro více než 98 % cílů.
• Reproduktibilita interbatch: <15 % RSD u většiny analyzovaných látek.
• Validace ve svalovině kuřecí, hovězí i vepřové prokázala obdobná výkonová kritéria.

Přínosy a praktické využití metody

Díky komplexnímu dMRM řešení lze simultánně sledovat široké spektrum látek bez nutnosti dělit analýzy podle chemických tříd. Databáze metod umožňuje rychlou konfiguraci sub-metod podle požadavků dané legislativy či cílového seznamu. Metoda výrazně zkracuje čas analýzy, snižuje spotřebu rozpouštědel a laboratorní náklady.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření workflow na další potravinové matice (mořské produkty, mléčné výrobky).
• Integrace plně automatizovaných extrakčních a čisticích systémů.
• Aktualizace databáze o nové analyty a varianty reziduí.
• Využití vysoce paralelních MS platform pro zvýšení průchodnosti analýz.

Závěr

Předložené end-to-end řešení Agilent pro analýzu více než 200 multiclass veterinárních léčiv v mase poskytuje vysokou citlivost, spolehlivost i reprodukovatelnost. Metoda je plně kompatibilní s globálními regulačními požadavky a vhodná pro rutinní screeningové i kvantitativní aplikace v oblasti kontroly potravinářských surovin.

Reference

• AOAC. Screening and identification method for regulated veterinary drug residues in food, Version 7, 2018.
• US FDA-CFR Title 21 Part 556. Tolerance of residues in new animal drugs in food, 2019.
• US FSIS. Chemical contaminants of public health concern, 2017.
• EU Commission Regulation (EU) No 37/2010. Pharmacologically active substances and MRL classification.
• AOAC Official Methods of Analysis Appendix F. SMPR for veterinary drug residue methods, 2016.
• Agilent Application Note 5994-1932EN. Quantitative screening of multiclass veterinary drugs in meat, 2020.