Quantitative Screening of Multiresidue Veterinary Drugs in Seafood Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS

Význam tématu

Monitoring reziduí veterinárních léčiv v mořských plodech je kritický pro ochranu veřejného zdraví, zajištění kvality potravin a splnění mezinárodních regulačních požadavků. Multireziduální screening umožňuje současné stanovení stovek analytů v komplexních matricích jako krevety či losos s vysokou průkazností a spolehlivostí.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit využitelnost kompletního pracovního postupu Agilent Comprehensive Veterinary Drug dMRM Solution pro kvantitativní screening 210 veterinárních léčiv ve vzorcích krevety a lososa. Hodnocena byla citlivost metody (LOD, LOQ), linearita kalibračních křivek, přesnost, přesnost opakování a obnovy při stanovení targetních reziduí.

Použitá metodika a instrumentace

Pracovní postup zahrnoval homogenizaci vzorku, extrakci organickým rozpouštědlem a následné čištění pomocí Agilent Captiva EMR–Lipid cartridge na pozitivní tlakové pomůcce PPM-48. Chromatografická separace probíhala na sloupci Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (2.1×50 mm, 2.7 µm) v kombinaci s Agilent 1290 Infinity II LC. Mobilní fáze A: voda s 4.5 mM formiátu amonného, 0.5 mM fluoridu amonného a 0.1 % kyseliny mravenčí; B: 50/50 ACN/MeOH se stejnými aditivy. Detekce byla prováděna na Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS v režimu dynamického MRM (dMRM) s časem cyklu 750 ms a optimalizovanými doby sběru (7–370 ms).

Instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity II Flexible Pump (G7104C)
• Agilent 1290 Infinity II Multisampler (G7167A)
• Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat (G7116A)
• Agilent Captiva EMR–Lipid 3 mL cartridges (5190-1003) na Agilent Positive Pressure Manifold PPM-48 (5191-4101)
• Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/TQ s iontovým zdrojem Agilent Jet Stream

Hlavní výsledky a diskuse

Limit detekce (LOD) se pohyboval v rozmezí 0.1–10 µg/kg, LOQ 0.25–25 µg/kg, všechny kalibrační křivky pro 210 analytů vykázaly linearitu R2>0.99. Opakovatelnost signálové odpovědi targetních MRM byla <14 % RSD, čas udržení <0.4 % RSD. Obnovy při pre-extrakčním spike (10 a 25 µg/kg) se u více než 93 % látek pohybovaly mezi 60 a 120 % s intrabatch RSD ≤20 %. Hodnocení matrix effect ukázalo >96 % analýtů s potlačením signálu menším než 25 %. Transfer metody na konfiguraci Agilent 1260 Infinity II Prime LC potvrdil srovnatelnou chromatografickou separaci. Ověření na platformě Agilent 6495C LC/TQ pak prokázalo další zlepšení citlivosti.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlý, robustní a vysoce průkazný postup je vhodný pro rutinní QA/QC a regulační kontroly v průmyslových a státních laboratořích. Jednotné workflow umožňuje efektivní multireziduální screening více než 200 léčiv v různých potravinářských matricích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření zahrnuje automatizaci přípravy vzorků, nasazení vysokorychlostních a vysokorozlišovacích hmotnostních spektrometrů, vývoj nových čistících sorbentů, sledování metabolitů a adaptaci workflow na rostlinné či environmentální vzorky s ohledem na změny regulací.

Závěr

Agilent Comprehensive Veterinary Drug dMRM Solution prokázal vynikající výkon při screeningu 210 veterinárních léčiv v krevetech a lososu. Metoda nabízí vysokou citlivost, přesnost, linearitu a robustnost, splňuje požadavky AOAC, FDA a EU na multireziduální analýzu v mořských plodech.

Reference

1. An End-To-End Workflow for Quantitative Screening of Multiclass, Multiresidue Veterinary Drugs in Meat Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS, Agilent Technologies application note 5994-1932EN, 2020.
2. AOAC Guidelines on Screening and Identification Method for Regulated Veterinary Drug Residues in Food, Version 7, June 20 2018.
3. Code of Federal Regulations Title 21: Tolerance of Residues in New Animal Drugs in Food, Part 556, Volume 6, April 1 2019.
4. Chemical Contaminants of Public Health Concern Used by the Food Safety and Inspection Service (FSIS), 2017.
5. Commission Regulation (EU) No 37/2010 on pharmacologically active substances and classification regarding maximum residue limits, Official Journal of the EU, 2010.
6. G5368AA Comprehensive Veterinary Drug dMRM Solution Workflow Guide, Agilent Technologies D0002979.