Robust and Verified LC-MS/MS Workflow for Screening of Multi-class Veterinary Drug Residues from Various Food Matrices

Význam tématu

Veterinární léčiva se používají při léčbě a růstu hospodářských zvířat. Nesprávné dávkování může vést k reziduím v potravinách s negativními dopady na lidské zdraví. Regulatorní limity mají chránit spotřebitele, proto je potřeba efektivních metod pro simultánní screening širokého spektra léčiv.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a verifikovat robustní LC-MS/MS workflow pro screening a kvantifikaci více než 200 veterinárních léčiv ze 28 chemických tříd ve 9 různých potravinových matricích. Metoda byla validována podle doporučení AOAC a globálních regulačních norem.

Použitá metodika

Vzorky 2 g byly dvakrát extrahovány kyselým acetonitrilem s EDTA, následovalo čištění na kazetách Captiva EMR-Lipid a PPM-48. Chromatografie probíhala na Poroshell 120 (13min) a detekce na režimu dynamického MRM. Validace zahrnovala stanovení LOD, LOQ, linearity, přesnosti, opakovatelnosti a obnovy.

Použitá instrumentace

Agilent 6470 a 6495 triple quadrupole LC/TQ; Agilent MassHunter software; Poroshell 120 superficially porous column; Captiva EMR-Lipid cartridge (p/n 5190-1003); Agilent PPM-48 (p/n 5191-4101); test mix Veterinary Drug System Suitability (p/n 5799-0015).

Hlavní výsledky a diskuse

• LOD: 90 % analyzovaných látek dosahuje ≤5 µg/kg ve všech maticích.
• Linearita: rozsah LOQ–100 µg/kg s R2 ≥0,99.
• Přesnost: 70–120 %.
• Opakovatelnost retence: <1 % RSD, signál <20 % RSD.
• Obnova: 92 % látek v rozmezí 60–120 % napříč 9 matricemi.
• Robustnost: konzistentní výsledky při 400 sekvenčních injekcích, minimální znečištění iontového zdroje.

Přínosy a praktické využití metody

• Simultánní screening více než 200 multiklasse látek.
• Vysoká propustnost: čištění 48 vzorků za 30 min, analýza 18 min inj-inj.
• Shoda s globálními MRL požadavky.
• Možnost přizpůsobení lokálním regulačním standardům.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rostoucí diverzita veterinárních látek vyžaduje rychlou adaptaci metod, automatizaci přípravy a využití vysoce rozlišujících hmotnostních analyzátorů. Integrace datových platforem a strojového učení může zrychlit interpretaci výsledků a detekci nových kontaminantů.

Závěr

Navržené LC-MS/MS workflow nabízí univerzální, citlivé a spolehlivé řešení pro rutinní kontrolu reziduí veterinárních léčiv v potravinách živočišného původu. Metoda splňuje přísné globální normy a je vhodná pro denní provoz v analytických laboratořích.

Reference

1. Screening and identification method for regulated veterinary drug residues in food, AOAC guidelines, Version 7, June 20, 2018.
2. The United States, Code of Federal Regulations (CFR) – Title 21, Part 556, April 1, 2019.
3. US FSIS Chemical contaminants of public health concern, 2017.
4. Commission Regulation (EU) No 37/2010 on pharmacologically active substances and their MRL classification.
5. AOAC Official Methods of Analysis Appendix F, 2016.
6. Agilent Application Notes 5994-1932EN, 5994-2832EN, 5994-3124EN, 5994-3680EN.