Chromatography in the Express Lane High Resolution, Fast LC

Význam tématu

Rostoucí požadavky na kapacitu, rychlost a ekonomičnost chromatografických analýz vedou k rozvoji rychlých, vysoce rozlišovacích LC metod.

Cíle a přehled studie

Článek popisuje implementaci vysokorozlišovací rychlé LC (High Resolution Fast LC) na přístrojích HPLC i UHPLC, včetně aplikací pro izokratické i gradientní separace.

Použitá metodika a instrumentace

Obrací se pozornost na výhody sub-2 μm a superficially porous částic (Poroshell 120) v délkách kolon od 50 do 150 mm. Diskutují se parametry jako teplota, složení mobilní fáze a tlaky až 1300 bar (Agilent 1290 Infinity II). Důležitými faktory jsou gradientní objem zpoždění, extra-kolonní objem, datová frekvence DAD a rychlé spojky A-Line Quick Connect.

Hlavní výsledky a diskuse

Snížením velikosti částic a optimalizací délky kolon se dosahuje až pětinásobného zkrácení doby analýzy při zachování nebo zvýšení rozlišení (R>1,5). Poroshell 120 EC-C18 2,7 μm o délce 50–100 mm nabízí podobné parametry jako sub-2 μm plné částice, ale při nižším backpressu (cca 300–500 bar). Zvýšením datové frekvence a minimalizací extra-kolonního objemu lze dosáhnout až 12 000–15 000 teoretických destiček a lepší citlivosti.

Přínosy a praktické využití metody

• Zrychlení rutinních QC a farmaceutických analýz
• Možnost přenosu existujících metod z HPLC na UHPLC bez zásadních změn chromatografických podmínek
• Využití stávajících přístrojů HPLC při použití superficially porous kolon k dosažení UHPLC výkonu

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj se očekává v oblasti mikro LC, vyšších tlaků nad 1500 bar a integrace s MS detekcí. Miniaturizace systémů a optimalizace směšovacích objemů umožní další zkracování analýz a zvyšování produktivity laboratoří.

Závěr

High Resolution Fast LC představuje efektivní cestu ke zkrácení doby analýzy bez kompromisů v rozlišení. Využití pokročilých částic a optimalizovaných instrumentálních podmínek přináší výrazné zlepšení výkonu jak na HPLC, tak na UHPLC systémech.