Completely Automated Extraction and Determination of Antibiotics in Eggs using a Robotic Autosampler and LC-MS/MS Platform

Význam tématu

Automatizovaná extrakce a stanovení antibiotik ve vejcích je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravin a minimalizaci rizika rezistentních bakteriálních kmenů. Vysoce přesné a reprodukovatelné metody s minimem manuálních zásahů zvyšují výtěžnost analytických prací v laboratorní i průmyslové praxi.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo plně automatizovat dosavadní manuální postup extrakce antibiotik z vajec a zajistit jeho kompatibilitu s LC–MS/MS platformou. Prokázat rychlou a reprodukovatelnou analýzu vybraných antibiotik při dosažení požadovaných mezí stanovitelnosti.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika kombinuje automatizovanou extrakci kapalina–kapalina, pass-through SPE čištění a následnou chromatografickou separaci s detekcí v triple kvadrupólu:

• MPS roboticPRO sampler (GERSTEL) s QuickMix, CF-200 centrifugou a Universal Filtration opcí
• Oasis PRiME HLB cartridgy pro odstranění fosfolipidů
• Agilent 1260 HPLC s Waters Acquity UPLC BEH C18 kolonkou (2.1×100 mm, 1.7 µm)
• Agilent Ultivo Triple Quadrupole MS s Jet Stream ESI
• Gradient 0.1 % formiová kyselina/voda vs. 0.1 % formiová kyselina/ACN, 0.4 mL/min, 10 min run

Hlavní výsledky a diskuse

Testovaná rychlá 2,5 minutová homogenizace pomocí QuickMix (2000 rpm) poskytla rovnoměrnou extrakci antibiotik ve srovnání s tradičními agitátory vyžadujícími až 30 min.

• Limity kvantifikace byly 5× nižší než průmyslové požadavky (LOQ v rozmezí 5–800 ng/mL).
• Linearita: R2 ≥ 0,99 pro všechny sledované sloučeniny.
• Přesnost (accuracy) průměrně 102 % (94,6 – 115 %), preciznost (RSD) 1,23 – 11,2 %.
• Oasis PRiME HLB účinně odstranil iontově potlačující fosfolipidy.

Přínosy a praktické využití metody

Spojka automatizované extrakce a LC–MS/MS analýzy zkracuje čas přípravy vzorku, zvyšuje propustnost laboratoře a minimalizuje operátorské chyby. Metodu lze adaptovat pro další rezidua veterinárních léčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření automatizace na vysokopropustné laboratoře, integrace umělé inteligence pro optimalizaci protokolů či zvýšení počtu sledovaných analyzovaných sloučenin. Další miniaturizace SPE a digitalizace dat rozšíří uplatnění v QA/QC a regulaci potravin.

Závěr

Plně automatizovaná metoda pro stanovení antibiotik ve vejcích prokázala vysokou efektivitu, reprodukovatelnost a schopnost potlačit interferující matrici. Nasazení v praxi přinese výrazné zrychlení analytických procesů a zlepšení spolehlivosti výsledků.

Reference

[1] Simple and Effective Cleanup for UPLC-MS/MS Determination of Veterinary Drug Residues in Egg, Waters Application Note, 2018.