QUANTITATIVE DETERMINATION OF VETERINARY DRUG RESIDUES IN EGGS BY UPLC-MS/MS USING A SIMPLE, RAPID AND EFFECTIVE CLEANUP APPROACH

Význam tématu

Stanovení reziduí veterinárních léčiv v vejcích je klíčové pro ochranu spotřebitelů před alergickými reakcemi a rozvojem rezistence k antibiotikům. Kvantifikace těchto látek zajišťuje bezpečnost potravin a plnění regulačních limitů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout jednoduchou, rychlou a účinnou metodu vzorkové přípravy a analýzy sedmnácti reprezentativních veterinárních léků z dvanácti tříd ve vaječné matrici. Metoda kombinuje extrakci kyselinou formiovou v acetonitrilu, průtokový SPE s kartridží Oasis PRiME HLB a UPLC-MS/MS analýzu.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorková příprava:

• Extrahováno 2,0 g homogenizovaných vajec 8 mL roztoku 0,2 % kyseliny formiové v poměru 80:20 acetonitril/voda; vortex 30 s, třepání 30 min, centrifugace.
• SPE cleanup s Oasis PRiME HLB (3 cc, 60 mg): 1 mL supernatantu průtokem, eluát zředěn 10 mM pufrem amonium formiátu (pH 4,5).

Chromatografie a detekce:

• UPLC: ACQUITY UPLC I-Class, kolona BEH C18 2,1 × 100 mm, 1,7 µm, 30 °C, 10 µL, gradient 0,1 % kyselina formiová ve vodě/methanolu, 0,4 mL/min.
• MS/MS: Xevo TQ-S, ESI+ (ESI– pro florfenikol), MRM režim, optimalizované parametry kapilárního napětí, plynů a teplot.

Hlavní výsledky a diskuse

Čištění Oasis PRiME HLB odstranilo více než 95 % fosfolipidů z vaječných extraktů a zajistilo zotavení většiny sloučenin nad 80 %, s výjimkou lasalokidu A a nystatinu A1. Limity detekce se pohybují v podppb úrovních, kalibrační křivky v matrici vykazují linearitu R2 > 0,99. Všechny analyty byly odděleny do 6,2 min. Přesnost stanovení překročila 70 % a opakovatelnost RSD < 20 %.

Přínosy a praktické využití metody

Tato metoda umožňuje simultánní stanovení vícero tříd veterinárních léčiv ve vejcích s vysokou účinností odstraňování matricových interferencí a krátkým časem analýzy. Je vhodná pro rutinní laboratorní kontrolu kvality, akreditované metody i regulační monitoring.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace vzorkové přípravy a rozšíření na další živočišné produkty (mléko, maso).
• Nasazení vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie pro screening nových reziduí.
• Optimalizace spotřeby rozpouštědel a další zkrácení analýzy.

Závěr

Navržená metoda splňuje regulační požadavky pro vícenásobné stanovení veterinárních léčiv ve vejcích, poskytuje spolehlivé výsledky a efektivní čištění vzorku vhodné pro rutinní analytickou praxi.

Reference

• Garrido Frenich A, Aguilera Luiz MM, Martinez Vidal JL, Romero-Gonzalez R. Comparison of several extraction techniques for multiclass analysis of veterinary drugs in eggs using ultra-high pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Analytica Chimica Acta. 2010;661:150–160.
• The Ministry of Agriculture Bulletin of PRC 235. 2002.
• Global MRL database. https://www.globalmrl.com/
• Young MS, Van Tran K. Simple and effective cleanup of seafood extracts prior to UPLC-MS/MS multi residue veterinary drug analysis. Waters Poster. 2015;PSTR134857156.