VITATOX: Pyridoxal -5- fosfát (vitamin B6) jako pomocný diagnostický marker u hypofosfatázie

Význam tématu

• Hypofosfatasie (HPP) je vzácné dědičné onemocnění způsobené defektem tkáňově nespecifické alkalické fosfatázy (TNSALP), vedoucí k poruše mineralizace kostí a závažným extraskeletálním projevům.
• Pyridoxal-5ʼ-fosfát (PLP), aktivní forma vitaminu B6, se v HPP hromadí v krvi díky snížené aktivitě ALP a představuje potenciální doplňkový diagnostický marker.

Cíle a přehled studie

• Cílem bylo zhodnotit úroveň PLP u pacientů s potvrzenou dětskou formou HPP a ověřit jeho využitelnost v diagnostice.
• Ve studii bylo zahrnuto šest pacientů pediatrické věkové kategorie s klinickými a biochemickými znaky HPP.

Použitá metodika a instrumentace

• Stanovení PLP proběhlo metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 370 nm, emisní 470 nm).
• Instrumentace: Agilent 1260 HPLC systém, kompletní kit ClinRep-RECIPE (RECIPE), biologický materiál – plazma pacientů.

Hlavní výsledky a diskuse

• Ve všech vyšetřovaných případech byly koncentrace PLP významně zvýšené (1000–3000 µg/l) oproti referenčnímu rozmezí 5–30 µg/l.
• Paralelně byla zjištěna nízká aktivita ALP v séru, zvýšené hladiny fosfoetanolaminu (PEA) a pyrofosfátu (PPi), zvýšené Ca a Pi, a snížený parathormon.
• Tyto farmakokinetické změny potvrzují poruchu funkce TNSALP a význam PLP jako biomarkeru pro diferenciaci HPP od jiných osteopatologií.

Přínosy a praktické využití metody

• Stanovení PLP umožňuje rychlé a neinvazivní podporující vyšetření pro podezření na HPP, zejména v pediatrii.
• Metoda přispívá k odlišení HPP od rachitidy a dalších osteomineralizačních poruch a usnadňuje včasnou diagnostiku a léčebné rozhodování.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Validace stanovovacích protokolů a stanovení cut-off hodnot PLP na větších kohortách pacientů.
• Integrace PLP do multiplexních panelů biochemických markerů osteologie a automatizace HPLC metodiky pro rutinní praxi.
• Využití PLP k monitorování účinnosti terapeutických režimů a sledování dlouhodobého vývoje kostního metabolismu.

Závěr

• Profil PLP se u pacientů s dětskou formou hypofosfatasie ukázal jako citlivý doplňkový diagnostický marker, potvrzující malfunkci ALP.
• Stanovení PLP je vhodné zahrnout do komplexního biochemického vyšetření při podezření na HPP, zvláště v raném pediatrickém věku.

Reference

• Rathburn J., 1948: První popis hypofosfatasie.
• Robison R., 1923: Charakterizace alkalické fosfatázy.