B Vitamin Analysis in Dietary Supplements on the Agilent 1290 Infinity III LC System

Význam tématu

Analýza vitamínů skupiny B v doplňcích stravy je nezbytná pro ověření deklarovaných nutričních hodnot, zajištění kvality výrobků a ochranu spotřebitele. Spolehlivá a reprodukovatelná metoda pomáhá výrobním i kontrolním laboratořím rychle a přesně stanovit obsah klíčových vitamínů.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo vyvinout a ověřit chromatografickou metodu pro simultánní stanovení sedmi vitamínů B (B1, B2, B5, B6, B7, B9 a B12) v tabletách a šumivých přípravcích. Důraz byl kladen na využití iontové párkové RP-LC s UV detekcí a na automatizaci přípravy systému pomocí Agilent InfinityLab Assist, která zkracuje dobu přípravy, snižuje spotřebu rozpouštědel a minimalizuje chyby operátora.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda je založena na chromatografii v obrácené fázi s iontovým páráním, kde buffer s heptansulfonátem sodným (pH 3,07) umožňuje dobrou retenci a tvar píku. Lineární gradient methanolu zajišťuje rozlišení všech analyzovaných vitamínů. Detekce probíhá pomocí diodového array detektoru při vlnových délkách 210, 246 a 268 nm.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity III High-Speed Pump
• Agilent 1290 Infinity III Multisampler s termostatem vzorků
• Agilent 1290 Infinity III Multicolumn Thermostat s rychlým výměníkem tepla
• Agilent InfinityLab Level Sensing
• Agilent InfinityLab Assist s modulem Make Ready a Standby
• Agilent 1290 Infinity III Diode Array Detector s Max-Light cartrdige buňkou
• Softwarové řízení Agilent OpenLab CDS
• Kolona Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2,1×100 mm, 2,7 µm

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje baseline separace všech vitamínů v reálných extraktech z tablet i šumivých tablet. Automatizovaná úloha Make Ready monitorovaná střední citlivostí zajistila reprodukovatelné doby ekvilibrace systému s RSD pod 0,11 %, oproti manuální ekvilibraci s RSD až 2,26 %. Automatizovaná úloha Standby umožnila řízené ukončení a opětovné spuštění systému, snížila dobu nečinnosti a riziko vysrážení soli v průtokové cestě.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení doby přípravy systému o více než 20 minut denně
• Reprodukovatelné a sledovatelné ekvilibrace bez nutnosti operátorského dohledu
• Snížení spotřeby rozpouštědel a energie díky optimalizované úloze Standby
• Minimalizace variability mezi operátory a rizika lidské chyby
• Jednoduchá integrace do rutinní QA/QC kontrol doplňků stravy

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat rozšíření metody o další vitamíny a bioaktivní složky, kombinaci s hmotnostní spektrometrií pro zlepšení citlivosti a selektivity, či implementaci strojového učení pro prediktivní plánování úloh a optimalizaci pracovních postupů. Integrace s LIMS a cloudovými řešeními přispěje k vyšší efektivitě laboratoří.

Závěr

Vyvinutá RP-LC-UV metoda s iontovým páráním na Agilent 1290 Infinity III spolehlivě stanovuje sedm vitamínů B v doplňcích stravy. Použití Agilent InfinityLab Assist automatizuje přípravu a ukončení analýz, zkracuje dobu přípravy, zvyšuje opakovatelnost a snižuje provozní náklady. Tento přístup přináší významné přínosy pro rutinní analýzy v průmyslových i kontrolních laboratořích.

Reference

• Best Practices for Using an Agilent LC System. Agilent Technologies technical note, SD-29000194, 2016–2022.
• Agilent InfinityLab Assist: A Local User Interface to Control and Automate Your HPLC System. Agilent Technologies white paper, 5994-7572EN, 2024.
• Dhale M.; Singh R.; Sharma R.; Arora S. Quantification of All B Vitamins in a Single Run Using Ion-Pair Modified Liquid Chromatography with UV Detection. Journal of Food Composition and Analysis 2023, 123, 105602.