Quantitative Analysis of Sugars in Fruit Samples Using Refractive Index Detection (RID-20A)

Význam tématu

Analýza obsahu jednoduchých a disacharidů ve vybraných plodech má klíčový význam pro výživu, monitorování příjmu cukrů a vývoj potravinových standardů. Přesné stanovení fruktózy, glukózy, sacharózy a laktózy umožňuje lépe porozumět metabolickým efektům přirozených i přidaných cukrů a podporuje informované rozhodování spotřebitelů i odborníků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo validovat chromatografickou metodu pro kvantifikaci čtyř hlavních cukrů ve vzorcích ovoce z místního trhu. Použit byl přístroj Shimadzu LC-2060C 3D ve spojení s refraktometrickým detektorem RID-20A. Celkem bylo analyzováno 11 druhů ovoce za účelem zjištění poměru jednotlivých složek a celkového obsahu cukru.

Použitá metodika a instrumentace

Pro chromatografii byla zvolena HILIC kolona s aminovou stacionární fází (5 µm, 4,6 × 250 mm). Mobilní fáze tvořil acetonitril : voda (75 : 25) v isokratickém režimu při průtoku 1,2 mL/min. Teplota kolony byla nastavena na 35 °C, objem injekce 10 µL a doba analýzy 25 min.

Pro přípravu standardů se ve vážených 10 mL nálevkách připravily zásobní roztoky 1 g cukru ve vodě a sérií ředění v rozmezí 0,2–10 %. Vzorky ovoce se drtily, extrahovaly směsí acetonitril : voda (50 : 50), centrifugovaly při 6 000 RPM a filtrovány přes 0,45 µm filtr.

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky měly koeficienty determinace R²>0,99 pro všechny cukry, což potvrzuje vysokou přesnost metody. Fruktóza a glukóza byly detekovány ve všech vzorcích, sacharóza byla přítomna v menším rozsahu a laktóza se ve vzorcích ovoce nevyskytla. Celkový obsah cukrů se pohyboval od 3,56 % (citrón) do 19,48 % (hrozny). Nejvyšší zastoupení fruktózy bylo obecně ve sladších plodech, sacharóza pak významně přispívala u banánů, manga a melounu.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlé a spolehlivé stanovení hlavních cukrů v čerstvém ovoci.
• Vhodné pro nutriční poradenství, kontrolu kvality a značení potravin.
• Možnost rozšíření na analýzu průmyslových produktů a nápojů.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace automatizované přípravy vzorků a online detekce.
• Využití spojení s hmotnostní spektrometrií pro širší metabolitické profilování.
• Vývoj miniaturizovaných a mobilních systémů pro pole a rychlé testování.

Závěr

Validovaná HPLC-RID metoda prokázala vysokou linearitu, přesnost a opakovatelnost kvantifikace fruktózy, glukózy a sacharózy v různých druzích ovoce. Metoda je robustní, snadno implementovatelná v laboratořích potravinářského průmyslu a poskytuje cenná data pro výživová hodnocení a regulaci.

Reference

1. Míguez Bernárdez M., González Pérez E., Díaz Villanueva M. T. HPLC determination of sugars in varieties of chestnut fruits from Galicia. Journal of Chromatographic Science. 2004;42(2):101–104.