Reproducing the TCM Method for the Characteristic Chromatogram of Guilin Xiguashuang

Význam tématu

Charakteristická chromatografie tradiční čínské medicíny je klíčovou metodou pro ověřování identity a kvality přípravků regulovaných v Čínské farmakopei. Díky stanoveným standardům lze dosáhnout reprodukovatelnosti chromatogramů napříč různými chromatografickými platformami, což je zásadní pro spolehlivou kontrolu kvality v praxi.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo reprodukovat metodu popsanou v Čínské farmakopei pro charakteristický chromatogram preparátu Guilin Xiguashuang pomocí systému Agilent 1290 Infinity II vybaveného technologií ISET a kolonou InfinityLab Poroshell HPH-C18. Výzkum zahrnoval emulaci Waters ACQUITY UPLC systémů a ověření souladu relativních retenčních časů (RRT) s požadavky farmakopeje.

Použitá instrumentace

• Kapalinový chromatograf Agilent 1290 Infinity II (binarni pumpa G7120A, multisampler G7167B, termostatovaná kolona G7116B, DAD G7117B)
• Chromatografický software Agilent OpenLab CDS verze 2.8 s modulem ISET verze 1.0
• HPLC kolona Agilent InfinityLab Poroshell 120 HPH-C18, 2.1×100 mm, 1.9 μm (č. dielu 695675-702)
• UV detekce na 254 nm

Použitá metodika

Mobilní fáze A: 0,2 % kyselina fosforečná + 0,2 % triethylaminu; B: acetonitril.
Gradientní program: 0–10 min 20→24 % B, 10–23 min 24→40 % B, 23–26 min 40 % B, 26–32 min 40→75 % B, 32–35 min 75→92 % B, 35–43 min 92→95 % B, zastavení v 45 min, kolona regenerace 6 min.
Průtok: 0,2 mL·min⁻¹, teplota kolony 30 °C, objem injekce 1 μL.
Vzorky a standardy připraveny dle monografie Guilin Xiguashuang Čínské farmakopei; reagencie a eluenty HPLC-kvality.

Hlavní výsledky a diskuse

• Provedeno srovnání různých fází Poroshell 120; pouze HPH-C18 zachovala pořadí a RRT všech 12 klíčových špiček v požadovaném intervalu ±10 %.
• Emulace Waters UPLC H-Class i I-Class pomocí ISET potvrdila shodu RRT na Agilent systému, s výjimkou špičky 12 při emulaci I-Class z důvodu odlišného objemu dwell.
• Nastavení mixeru a objemu vzorkové smyčky (optimalizace mezi 0 a 100 μL) prokázalo zlepšení rozlišení špiček 7 a 8.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje laboratořím převádět chromatografické postupy Čínské farmakopeje na platformy Agilent bez nutnosti modifikovat původní protokoly. Zajišťuje konzistentní kontrolu kvality TCM preparátů, zkracuje čas na validaci a zvyšuje interoperabilitu mezi různými LC systémy.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření emulace ISET na další preparáty tradiční čínské medicíny a farmakopejní metody.
• Integrace pokročilých nástrojů pro automatizované přenosy metod napříč různými výrobci LC systémů.
• Využití dat z emulovaných měření pro strojové učení a predikci chování špiček.

Závěr

Agilent 1290 Infinity II s technologií ISET a kolonou Poroshell HPH-C18 úspěšně reprodukoval charakteristický chromatogram Guilin Xiguashuang dle požadavků Čínské farmakopeje. Emulace Waters UPLC systémů potvrdila shodu RRT a zlepšila rozlišení klíčových znakových špiček, což podporuje spolehlivou kontrolu kvality TCM na platformách Agilent.

Reference

China National Medical Products Administration and National Health Commission. Chinese Pharmacopeia. 2025 Edition, Vol 1: Guilin Xiguashuang.