Fully Automated Sample Preparation Module for Glycan Analysis MUP-3100

Význam tématu

Struktura glykosidických řetězců (glykánů) připojených k protilátkám ovlivňuje stabilitu, biologickou aktivitu a kvalitu bioléčiv. Proto je přesné a reprodukovatelné profilování glykosylace klíčové pro kontrolu výrobních procesů a zajištění konzistence léčivých přípravků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem článku je představit plně automatizovaný modul MUP-3100 pro přípravu vzorků při analýze N-glykánů a volitelné O-glykánové moduly. Popisuje uspořádání automatizovaného pracovního postupu s využitím Auto-EZGlyco™ kitů (mAb-N a O-Type) od Sumitomo Bakelite a demonstruje zvýšení průchodnosti a zlepšení reprodukovatelnosti výsledků.

Použitá metodika a instrumentace

Automatizovaný protokol zahrnuje:

• Zachycení a purifikaci protilátek ze vzorku (kulové sloupcové nosiče).
• Enzymatické uvolnění N-glykánů (2-AB značení) a O-glykánů (oximace).
• SPE čistění a separaci pomocí Shim-pack GIST-HP Amide (Metal Free) kolony.
• Fluorescenční detekci HPLC a LC-MS analýzu (HPLC + fluorescenční detektor; vysoce citlivý LC-MS analyzátor).

Hlavní výsledky a diskuse

Implementace MUP-3100 umožnila:

• Předzpracování 24 vzorků N-glykánů během 6 hodin (vs. >48 hodin manuálně).
• Stabilní relativní plošné poměry špiček bez ohledu na intenzitu analyzovaných vzorků.
• Detekci a ukládání chybových stavů pomocí sensorů a obrazové kontroly umístění spotřebního materiálu.
• Automatické generování protokolů a ukládání videí událostí před a po chybě pro snadný troubleshooting.

Přínosy a praktické využití metody

Automatizace přináší:

• Výrazné snížení pracovní zátěže analytika a rizika lidské chyby.
• Zvýšení laboratorní kapacity a možnost nočního provozu bez dohledu.
• Konzistentní kvalitu dat vhodnou pro GMP/QC procesy ve výrobě bioléčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace umělé inteligence pro pokročilou detekci anomálií a optimalizaci protokolů.
• Rozšíření modulární platformy na další typy glykoproteinů mimo monoklonální protilátky.
• Online monitoring kultivačních procesů a prediktivní údržba přístrojového vybavení.

Závěr

Modul MUP-3100 ve spojení s Auto-EZGlyco™ kity významně urychluje a standardizuje předúpravu glykánů z protilátek a dalších glykoproteinů, což přispívá k vyšší efektivitě analýzy, reprodukovatelnosti dat a podpoře kvality bioproduktů.

Reference

1. Kameyama A. a kol., A practical method of liberating O-linked glycans from glycoproteins using hydroxylamine and an organic superbase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 513(1), 186–192 (2019).