Qualitative Analysis of 15 Traditional Nitrosamines in Thalassemia drug at Ultra-trace Levels Using LC/TQ

Význam tématu

Mutagenní nitrosaminy představují závažné riziko pro zdraví i bezpečnost pacientů, a to i při stopových koncentracích. Jejich sledování v léčivých přípravcích je proto klíčové pro splnění předpisů regulačních úřadů a zajištění kvality farmaceutických produktů.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřila na kvantitativní analýzu 15 tradičních nitrosaminů v chelatačním léčivu deferiprone, používaném u pacientů s talasémií. Cílem bylo vyvinout rychlou, citlivou a reprodukovatelnou metodu schopnou detekovat nitrosaminy v ultra-stopových hladinách pod požadovanou mez stanovení.

Použitá instrumentace

• UHPLC soustava Agilent 1290
• Triple kvadrupólový hmotnostní spektrometr Agilent 6495D
• APCI (+) ionizační zdroj
• Kolona Poroshell 120 EC-C18, 2,7 µm

Použitá metodika

Vzorek: 100 mg práškového deferipronu v 1 mL ultrapure vody. Nitrosaminy byly doplňkově přítomny jako spike: NDELA 1 ng/100 mg, ostatní analyty 0,1 ng/100 mg. Po promíchání (vortex, 5 min), odstředění (10 000 g, 5 min) a filtrace (0,2 µm) se nadrcený supernatant vstřikoval objemem 20 µL.
Chromatografie: gradientní eluce s mobilními fázemi voda (A) a acetonitril (B), teplota kolony 40 °C, rozdělovač toku divergoval hlavní složku (deferiprone) do odpadu mezi 5,25–8 min.
MS parametry: sušící plyn 290 °C, 11 L/min; tlak nebulizéru 55 psi; koronový proud 4 µA; vaporizér 350 °C; dynamický MRM režim.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla lineární kalibrace v rozsahu 0,05–5 ng/mL pro všechny analyty s špičkovou regresí R2 ≥ 0,998. Reprodukovatelnost (RSD) u šesti replikátů při 0,05 ng/mL se pohybovala v rozmezí 2,5–9 %. Získané recovery při LOQ (0,1 ng/100 mg, resp. 1 ng/100 mg pro NDELA) se pohybovaly mezi 82 a 118 %. Metoda vykazuje citlivost 3× až 8 000× lepší než požadované meze stanovení.

Přínosy a praktické využití metody

Analýza umožňuje rychlé a spolehlivé sledování nitrosaminů v lékových formulacích s ultra-stopovou citlivostí. Zavedená procedura minimalizuje riziko kontaminace hlavní složkou díky diverteru, splňuje požadavky regulačních norem a je vhodná pro rutinní kontrolu kvality API i hotových tablet.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším směrem je rozšíření metody na další skupiny mutagenních nechtěných látek a adaptace na vysokoproduktní screening. Využití moderních ionizačních technik a softwarové podpory pro automatizaci datové analýzy rozšíří možnosti sledování kontaminant v komplexních matricích.

Závěr

Vyvinutá LC/TQ metoda pro analýzu 15 nitrosaminů v deferipronu nabízí vynikající citlivost, přesnost a reprodukovatelnost. Splňuje přísné požadavky regulatorních agentur a je vhodná pro rutinní aplikaci ve farmaceutických laboratořích.

Reference

1. FDA: FDA updates and press announcements on angiotensin II receptor blocker recalls (valsartan, losartan).
2. FDA: Guidance for industry – Control of nitrosamine impurities in human drugs.