Isocratic Separation of Basic, Neutral, and Acidic Molecules on a Thermo Scientific™ Acclaim™ Mixed-Mode WAX-1 Column

Význam tématu

Analytická separace směsí obsahujících zásadité, neutrální a kyselé sloučeniny představuje významnou výzvu v oblasti farmaceutické, environmentální i klinické analýzy. Různá polarita a ionizační vlastnosti látek vyžadují pokročilé chromatografické techniky, které zajistí dostatečné rozlišení a kvalitu dat.

Cíle a přehled studie

Tato studie demonstruje izokratickou separaci jedenácti modelových sloučenin s odlišnou chemickou povahou na kolonce Thermo Scientific Acclaim Mixed-Mode WAX-1. Cílem bylo ověřit schopnost kolony zajistit základní rozlišení látek v rámci jediného běhu bez nutnosti gradientní eluce.

Použitá metodika a instrumentace

• Kolonka: Thermo Scientific Acclaim Mixed-Mode WAX-1 (4,6 × 150 mm, 5 µm)
• Teplota: 30 °C
• Mobilní fáze: 50/50 (v/v) acetonitril/fosfátový pufr (6,8 g KH2PO4 a 0,5 g NaP2O7•10H2O na 1000 g H2O, pH 6,0)
• Průtok: 1,0 ml/min
• Injekční objem: 5 µl
• Detekce: UV při 220 nm
• Role pyrofosfátu: potlačení interference kovových iontů

Hlavní výsledky a diskuse

Izokratické podmínky umožnily dosáhnout základního rozlišení všech jedenácti analyzovaných sloučenin v čase 0–20 minut. Separation mechanismus kombinuje hydrofobní interakce, aniontovou výměnu a kationtovou exkluzi. Eluční pořadí bylo: 1. kofein, 2. acetaminofen, 3. amitriptylin, 4. hydrokortison, 5. dexamethason, 6. jodid, 7. benzoová kyselina, 8. fenanthren, 9. salicylová kyselina, 10. ketoprofen, 11. naproxen sodná sůl.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje rychlou, reprodukovatelnou a robustní separaci širokého spektra kyselých, neutrálních a zásaditých látek bez složitého gradientního programu. Uplatní se v QA/QC farmaceutických provozů, klinických laboratořích a při environmentálním monitoringu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dále se očekává rozšíření mixed-mode kolon o gradientní eluce pro ještě širší rozsah pH a polarity, integrace s hmotnostní spektrometrií pro vícerozměrnou analýzu a vývoj metod pro stabilitu léčiv nebo screening metabolitů.

Závěr

Studie potvrdila schopnost kolony Acclaim Mixed-Mode WAX-1 efektivně a rychle separovat směsi základitých, neutrálních a kyselých sloučenin pod izokratickými podmínkami. Tato jednoduchá a univerzální metoda nachází široké uplatnění v laboratorní rutině.