Separation of Nicotinic Acid and Thiocyanate on a Thermo Scientific™ Acclaim™ Mixed-Mode WAX-1 Column

Význam tématu

Separace aniontů s odlišnou hydrofobicitou představuje výzvu v běžných reverzních fázích. Kombinované kolony s aniontovou výměnou a reverzní fází nabízejí širší selektivitu a umožňují spolehlivou analýzu důležitých sloučenin, jako je vitamin B3 (nikotinová kyselina) a lipofilní thiokyanát.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo prokázat účinnost kolony Thermo Scientific™ Acclaim™ Mixed-Mode WAX-1 při simultánní separaci nikotinové kyseliny a thiokyanátu. Studie demonstruje optimalizaci podmínek mobilní fáze pro dosažení vysokého rozlišení a jednotného tvaru píku pro oba analyty.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byla zvolena kolon

• Thermo Scientific™ Acclaim™ Mixed-Mode WAX-1, 3 µm, 3,0 × 150 mm
• LC systém: Thermo Scientific™ Dionex™ UltiMate™ 3000
• Mobilní fáze: směs acetonitrilu a vody s přídavkem 45 mmol NH4H2PO4, 5 mmol (NH4)2HPO4 a 0,25 mmol Na4P2O7•10H2O
• Průtok: 0,64 mL/min
• Teplota kolony: 30 °C
• Injekční objem: 6 µL
• Detekce: UV při 210 nm

Princip metody spočívá v kombinaci reverzní fáze a slabé aniontové výměny ve stejné pevné fázi, což umožňuje retenční mechanismy závislé jak na hydrofobicitě, tak na náboji analyzovaných molekul.

Hlavní výsledky a diskuse

Oba analyty byly adekvátně zadrženy a separovány s vynikajícím rozlišením a symetrií píků. Thiokyanát vykazuje výraznější citlivost na podíl acetonitrilu než nikotinová kyselina, což umožňuje zkrácení doby analýzy úpravou organické složky mobilní fáze. Optimalizace pH a koncentrace pufru navíc podporuje stabilní reproducibilitu retence.

Přínosy a praktické využití metody

• Univerzální platforma pro analýzu aniontů s proměnnou hydrofobicitou.
• Vyšší selektivita než u čistě reverzních fází pro polární a lipofilní anionty.
• Možnost rychlé úpravy separačních podmínek (organika, pH, pufr).
• Vhodné řešení pro farmaceutickou, potravinářskou a environmentální analýzu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj může směřovat k integraci této technologie do automatizovaných high-throughput systémů a k využití širšího spektra pufrů pro selektivní cílení na specifické anionty. Kombinace s hmotnostní spektrometrií otevírá nové možnosti kvantifikace stopových látek v komplexních matricích.

Závěr

Acclaim Mixed-Mode WAX-1 kolona dokázala efektivně separovat nikotinovou kyselinu a thiokyanát při jediné analýze. Flexibilita v úpravě mobilní fáze a kombinované retenční mechanismy poskytují robustní a rychlou metodu pro analytické aplikace vyžadující simultánní detekci aniontů s rozdílnou hydrofobicitou.

Reference

• Thermo Fisher Scientific Inc. (2009). Separation of Nicotinic Acid and Thiocyanate on a Thermo Scientific™ Acclaim™ Mixed-Mode WAX-1 Column.