Separation of Hydroxybenzoic Acids on a Thermo Scientific™ Acclaim™ Organic Acid (OA) Column

Význam tématu

Hydroxybenzoové kyseliny představují důležitou skupinu polárních organických kyselin využívaných v potravinářské analýze, farmacii i environmentálním monitoringu. Jejich přesná separace a kvantifikace je klíčová pro kontrolu kvality, sledování stability vzorků a ověřování bezpečnosti produktů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo ověřit schopnost kolony Thermo Scientific™ Acclaim™ Organic Acid (OA) oddělit pět běžných hydroxybenzoových kyselin v rámci jedné analýzy. Studie demonstruje optimalizovanou metodu HPLC s UV detekcí a hodnotí dobu analýzy i kvalitu separace.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda je založena na reverzní fázové HPLC:

• Kolona: Thermo Scientific™ Acclaim™ OA, 5 µm, 4 × 150 mm
• Mobilní fáze: 30 % acetonitril / 70 % 5 mM methansulfonové kyseliny (v/v)
• Teplota kolony: 30 °C
• Průtok: 0,75 mL/min
• Objem injekce: 5 µL
• Detekce: UV při 230 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Za zvolených podmínek došlo k baseline separaci pěti látek během přibližně 10 minut. Retenční časy odpovídaly následujícím sloučeninám:

• 3,4,5-Trihydroxybenzoová kyselina
• 3,5-Dihydroxybenzoová kyselina
• 4-Hydroxybenzoová kyselina
• 2,5-Dihydroxybenzoová kyselina
• Benzoová kyselina

Chromatogram prokázal ostré a dobře oddělené píky se stabilní retencí, což svědčí o vhodnosti kolonové fáze pro polaritu a kyselost této skupiny sloučenin.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená metoda nabízí:

• Rychlou analýzu (<10 min) vhodnou pro rutinní provoz
• Vysokou opakovatelnost retencí a plošných integrálů
• Univerzální aplikaci v potravinářských, farmaceutických a environmentálních laboratořích

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda lze dále rozvíjet:

• Integrací s hmotnostní spektrometrií pro potvrzení struktury
• Použitím ultrarychlých kolon pro zkrácení doby analýzy
• Úpravou pH nebo složení mobilní fáze pro lepší rozlišení dalších fenolových kyselin

Závěr

Thermo Scientific™ Acclaim™ OA kolona se ukázala jako efektivní nástroj pro separaci hydroxybenzoových kyselin. Metoda je robustní, rychlá a vhodná pro širokou škálu analytických aplikací.