Comparison of Five Acclaim Reversed-Phase Columns for the Separation of NITC Derivatives of Volatile Amines

Význam tématu

Volatilní aminy představují významné riziko v pracovním prostředí a jejich přesné stanovení je nezbytné pro ochranu zdraví pracovníků. Derivatizace pomocí 1-naphthylisothiokyanátu (NITC) umožňuje citlivou detekci aminů díky tvorbě UV-aktivních thiourea derivátů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo porovnat separační výkon pěti různých reverzně-fázových kolón Thermo Scientific Acclaim (120 C18, C30, PolarAdvantage, PolarAdvantage II, 120 C8) při analýze NITC derivátů tří volatilních aminů: ethylendiaminu, diethylentriaminu a triethylentetraminu.

Použitá metodika a instrumentace

Derivatizace aminů byla prováděna reagencí s NITC v DMF. Separace se realizovala kapalinovou chromatografií:

• Kolóny: Acclaim 120 C18, C30, PolarAdvantage, PolarAdvantage II, 120 C8 (3 µm, 3 × 150 mm)
• LC systém: Thermo Scientific Dionex UltiMate 3000
• Mobilní fáze: A: methanol, B: 10 mM kyselina mravenčí; gradient z 50:50 na 100:0 (0–7 min), udržení do 12 min
• Průtok: 0,425 mL/min; teplota: 30 °C; objem injekce: 1,0 µL
• Detekce: diodové pole, zobrazeno při 280 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny kolóny umožnily oddělení tří NITC derivátů:

• Acclaim 120 C18: vyvážený poměr mezi retenčním časem a rozlišením, nejstabilnější zónové špičky
• C30: delší retence, vhodné pro složitější vzorky, riziko rozšiřování špiček
• PolarAdvantage: zlepšený tvar špiček u polárních derivátů
• PolarAdvantage II: zvýšená selektivita mezi strukturně příbuznými aminami
• 120 C8: nejkratší doba analýzy, kompromis v rozlišení

Optimalizace vychází z kompromisu mezi rychlostí analýzy a úrovní separace.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje citlivé a reprodukovatelné stanovení volatilních aminů dle požadavků OSHA pro monitorování pracovního prostředí. Ukazuje flexibilitu při výběru kolony podle priorit laboratoře (rychlost vs. rozlišení).

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry vývoje zahrnují:

• Přechod na UHPLC s částicemi <2 µm pro zkrácení analýzy
• Nové stacionární fáze s odlišnými selektivními vlastnostmi
• Automatizovaná inline derivatizace pro vyšší vzorkovou průchodnost
• Kombinace s hmotnostní spektrometrií pro další potvrzení identity sloučenin

Závěr

Reverzně-fázová HPLC s derivatizací NITC se ukázala jako spolehlivá a citlivá metoda pro analýzu volatilních aminů v pracovním prostředí. Volba konkrétní kolony umožňuje přizpůsobit metodu požadavkům na rozlišení a dobu analýzy.

Reference

• Thermo Fisher Scientific. Application Note PB20616_E, 2012.