Comparison of Five Acclaim Reversed-Phase Columns for the Separation of NBD Derivatives of Volatile Amines

Význam tématu

Analýza těkavých aminů je klíčová pro zajištění bezpečnosti pracovního prostředí, protože tyto sloučeniny mohou způsobovat podráždění dýchacích cest a další zdravotní rizika.
Derivatizace pomocí 4-chloro-7-nitro-1,2,3-benzoxadiazolu (NBD-chlorid) vytváří silně barvené a fluorescenční produkty, což výrazně zlepšuje citlivost a selektivitu chromatografické detekce.
Reverzní fázová chromatografie představuje rychlejší a často vysoce výkonnou alternativu k tradičním normálním fázím využívaným v metodách OSHA.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo porovnat schopnost separace NBD-derivátů čtyř těkavých aminů (NBD-methylamin, NBD-dimethylamin, NBD-ethylamin, NBD-diethylamin) na pěti různých reverzních fázových kolonkách Thermo Scientific Acclaim:

• Acclaim C30
• Acclaim 120 C8
• Acclaim 120 C18
• Acclaim PolarAdvantage
• Acclaim PolarAdvantage II

Hodnotila se selektivita, doba analýzy a účinnost separace každého sloupce.

Použitá metodika a instrumentace

Systém:

• LC systém: Thermo Scientific Dionex UltiMate 3000
• Kolonky: 3 µm, 3 × 150 mm
• Mobilní fáze: methanol : 10 mM kyselina mravenčí 60 : 40 (v/v)
• Průtok: 0,50 mL/min
• Teplota: 25 °C
• Objem injekce: 1,0 µL
• Detektor: diodový array (200–600 nm), zobrazeno při 470 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny testované kolonky prokázaly dostatečnou selektivitu pro oddělení čtyř NBD-derivátů, avšak s odlišnou retencí a dobou analýzy:

• Acclaim C30 vykázal nejkratší časy retence všech analytů a nejvyšší rychlost separace.
• Acclaim C18 a C8 nabídly vyvážený poměr selektivity a účinnosti, s mírně delší analýzou než C30.
• PolarAdvantage a PolarAdvantage II zajistily lepší retenci u vyšší polarity derivátů, avšak za cenu prodloužené doby analýzy.

Rozdíly v separačním chování souvisejí s odlišnou povrchovou a chemickou úpravou stacionárních fází.

Přínosy a praktické využití metody

Díky vysoké rychlosti a citlivosti je metoda vhodná pro rutinní monitorování těkavých aminů v pracovním prostředí v souladu s požadavky OSHA.
Snížená doba analýzy přispívá k vyšší průchodnosti a efektivitě laboratoří.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se dalši vývoj sloupcových materiálů pro ještě lepší selektivitu a stabilitu.
Integrace s hmotnostní spektrometrií (LC–MS) může rozšířit možnosti detekce a identifikace neopakovaných či stopových aminů.
Automatizace přípravy vzorků a on-line derivatizace přispěje k vyšší reprodukovatelnosti a snížení práce operatorů.

Závěr

Reverzní fázová chromatografie NBD-derivátů těkavých aminů poskytuje rychlou a citlivou analýzu.
Acclaim C30 v kombinaci s Dionex UltiMate 3000 systémem přinesl nejkratší dobu analýzy při zachování vysoké kvality separace.

Reference

1. U.S. OSHA Method 91: Analysis of Volatile Amines by Derivatization with NBD-Chloride.
2. Thermo Fisher Scientific, Application Note PB20614_E, Comparison of Five Acclaim Reversed-Phase Columns for NBD Derivatives, ©2012.