Analysis of allergens in food

Význam tématu

Potravinové alergeny představují riziko pro citlivé jedince a jejich spolehlivá detekce je nezbytná pro bezpečnost spotřebitele a dodržení legislativních požadavků.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout cílenou LC-MS metodu pro kvantifikaci 17 vybraných peptidů sloužících jako markery potravinových alergenů. Studie ověřila chromatografickou separaci na C18-AQ koloně a citlivou detekci režimem MRM.

Použitá metodika a instrumentace

Chromatografie probíhala na přístroji Nexera X3 s kolonou Shim-pack GIST-HP C18-AQ (100×2,1 mm, 1,9 µm) při teplotě 40 °C. Mobilní fáze A byla voda s 0,1 % kyseliny mravenčí, fáze B acetonitril s 0,1 % kyseliny mravenčí. Gradient začínal na 2 % B, postupně se zvyšoval až na 95 % B a vracel se na počáteční podmínky v čase 20 min. Průtok činil 0,5 mL/min (s úpravou na 0,35 mL/min v období 16–18 min), objem injekce 3 µL.

Detekce byla zajištěna masovým spektrometrem LCMS-8060NX s IonFocus ESI v pozitivním režimu a MRM akvizicí. Použity byly standardní parametry: mlžící plyn 2,0 L/min, sušící plyn 3,0 L/min, ohřívací plyn 17,5 L/min, teplota rozptylové linie 150 °C, blokového ohřívače 300 °C a rozhraní 250 °C.

Hlavní výsledky a diskuse

Vyvinutá metoda dosahuje vysoké selektivity a nízkých detekčních limitů pro všechny sledované peptidy v rámci 20minutové analýzy. Chromatogramy prokázaly dobré rozlišení a reprodukovatelnost retencí i intenzit signálu. Metoda byla úspěšně validována z hlediska linearity, přesnosti a opakovatelnosti.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená LC-MS MRM metoda umožňuje rychlou a spolehlivou analýzu proteinových alergenů v potravinách. Díky krátkému doběhu a vysoké citlivosti je vhodná pro rutinní laboratorní aplikace v QA/QC a prokazování souladu s potravinářskou legislativou.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj může směřovat k rozšíření panelu peptidů pro další potravinové matrixy, automatizaci přípravy vzorků a integraci s kapalinovou přípravou vysoce propustných platforem. Kombinace s iontovou mobilitou by mohla zlepšit separaci izobarických sloučenin.

Závěr

Studie prokázala, že použití kolon Shim-pack GIST-HP C18-AQ v kombinaci s LCMS-8060NX ESI-MRM poskytuje robustní a citlivý nástroj pro kvantifikaci potravinových alergenů na úrovni peptidových markerů.

Reference

Shimadzu Corporation. Application News 01-00665 (JP), First Edition Sep. 2024.